碰到出血状态不确定的小鼠原代样本，怎样分选合格 CD8+T 细胞？广东省人民医院课题组 Demo

在日常原代免疫细胞分离工作中，科研人员常会碰到一类棘手样本：动物外观出现异常体征，但并未做任何实验造模。本次广东省人民医院课题组就遇到这样的现实难题——实验小鼠没有接受造模处理，但体表出现不明原因背部出血点。即便课题组依旧将它当作常规实验小鼠使用，也无法完全排除该异常体征对脾脏微环境、细胞表面分子标记带来的潜在干扰。

 

与此同时，这份脾脏样本里 CD8+T 细胞占比只有 5%，属于低频亚群。原代细胞分选作为免疫学实验的上游关键环节，细胞纯度与活性直接决定后续功能实验是否稳定可重复。本次 Demo 使用新鲜脾脏单细胞悬液，实地验证FiniGet 分必得® 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒（130-6003）处理这类复杂原代样本的实际表现。

 

整套分选严格遵循官方说明书操作，全程 15 分钟即可完成细胞获取；样本前处理无需裂红，全程不用避光，分选缓冲液中添加的胎牛血清也无需灭活。Mouse FcR Blocker 为可选组分，本次现场实操未使用该试剂。

 

Demo 实测基础信息

· 实测场景：广东省人民医院课题组上门分选 Demo
· 实测日期：2026-08-18
· 分选方案：小鼠 CD8+ T 细胞无柱磁珠阴性分选
· 实验样本：小鼠新鲜脾脏单细胞悬液；小鼠未进行人工造模，个体存在不明原因背部出血点；样本新鲜制备，流式检测 CD8+T 细胞占比 5%
· 实测试剂盒：FiniGet 分必得® 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒（130-6003）
· 生产厂商：信天翁生物科技（广州）有限公司
· 配套耗材：GOONIE 140-2001 细胞分选缓冲液、GOONIE 140-2000 单孔磁力架

 

现场完整实测数据

样本要点：样本生理状态存在疑问，CD8+T 为低频亚群。

· 分选前总细胞：1×10⁸
· 分选前脾脏样本 CD8+T 细胞占比：5%
· 分选后收获细胞量：2×10⁶
· 分选后 CD8+T 细胞流式检测纯度：93.5%

 

分选结果与产品核心优势

实际科研工作里，经常会遇到这类状态存疑的原代小鼠脾脏样本。一方面动物出现不明体表体征，很难预判脾脏内部细胞状态；另一方面靶细胞占比偏低，杂细胞占比高，对分选体系的除杂能力、细胞保护能力都是考验。一旦分选环节出问题，不仅浪费动物样本，还会直接造成下游功能、转录组实验数据波动，影响整套实验的可信度。

 

本次现场实测，直观展现 FiniGet 分必得® 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒应对这类复杂原代样本的能力：

· 试剂盒采用阴性分选策略，依靠生物素标记的多种单克隆抗体组合标记非目标细胞，再通过链霉亲和素磁珠将杂细胞一并去除；终收获的 CD8+T 细胞不带磁珠、不被抗体修饰，细胞不会发生异常激活，收集之后可以直接开展各类下游功能实验；
· 采用无柱式磁珠体系，不需要分选柱，依靠配套磁力架完成分离，规避过柱带来的机械剪切损伤，适合状态不确定的珍贵原代样本。根据磁力架型号不同，可选择倾倒收集或者枪头吸取上清两种方式；
· 实验流程简洁友好：样本制备无需裂红，全程无需避光，分选缓冲液所用胎牛血清不用灭活，整套操作仅 15 分钟。试剂盒新增 Mouse FcR Blocker 减少非特异性结合；
· 在这份 CD8+T 细胞仅 5%、状态存疑的实际样本上，依旧拿到 93.5% 的分选纯度，帮助课题组在复杂条件下获得合格的 purpose 细胞，为下游实验的稳定可重复打下上游基础。

经试剂盒分离得到的高纯度小鼠 CD8+T 细胞，可用于 T 细胞功能验证、免疫应答研究、转录组与单细胞测序等多种免疫学实验。

 

常见问题

Q1：样本生理状态存疑，脾脏 CD8+T 细胞占比仅有 5%，阴性分选还能得到高纯度细胞吗？

当原代样本本身状态存在不确定因素，同时靶细胞属于低频亚群时，杂细胞背景复杂，分选难度会明显上升，分选好坏直接影响后续实验可靠性。FiniGet 分必得® 130-6003 本次广东省人民医院课题组实测，该份新鲜脾脏样本起始 CD8 占比 5%，分选后纯度可达 93.5%。但分选结果仍会受小鼠个体情况、脾脏细胞活性、人为操作等因素影响，存在个体波动。

 

Q2：做小鼠 CD8 分选，阴性分选和阳性分选该怎么选？

针对 FiniGet 分必得® 系列试剂盒：阴性分选收获完全无标记的 CD8+T 细胞；阳性分选依靠磁珠直接捕获靶细胞。本品牌阳选得到的细胞不会引发 T 细胞异常激活，两种方案获得的细胞都可以直接用于下游功能实验。科研人员可以结合自己实验是否需要无标记细胞、样本丰度灵活选择。

 

Q3：使用 130-6003 分选，需要避光、裂红，或是灭活 FBS 吗？Mouse FcR Blocker 是必须添加的吗？

整套操作不需要避光；制备脾脏单细胞悬液不用做裂红处理；分选缓冲液内添加的胎牛血清无需提前灭活。Mouse FcR Blocker 为可选组分，可根据实验需求决定是否添加。

 

Q4：处理生理状态不确定的小鼠脾脏原代样本，分选时有哪些需要留意的细节？

脾脏取材后尽快制备新鲜单细胞悬液；研磨过筛要充分，去除组织碎片和血凝块。不同小鼠个体免疫亚群差异较大，分选前建议做流式基线检测，了解原始占比。磁珠使用前务必涡旋充分混匀 30 秒，混匀后不要高速离心。

 

Q5：不同磁力架收集细胞有什么区别？

建议使用对应型号配套磁力架，反应体系体积不要超过磁极的适用上限，保证磁珠捕获效率，减少杂细胞残留。单孔磁力架可采用倾倒法收集；八联排磁力架推荐枪头吸取上清，枪头切忌触碰管壁吸附的磁珠。