实验秘诀 | 动物组织细胞核悬液制备试剂盒使用攻略

冷冻组织拿出来一解冻就黏糊糊，细胞核根本提不完整！”“离心后核层找不准……做动物组织研究的小伙伴，是不是总被细胞核提取的难题绊住脚？别慌！今天给大家安利一款“科研神器”——百奥益康动物组织细胞核悬液制备试剂盒（BA3302），从材料准备到质控收尾，手把手教你搞定提核全流程，让实验效率直接拉满！

 

 

 

一、3 大优势戳中科研痛点

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1、“通用款”不挑组织：不管是肝脏、心脏还是肾脏，冷冻状态下都能高效提核，不用再为不同组织换不同方案；

 

2、核纯度拉满：特配的分层液能精准分离细胞核与杂质，离心后核层清晰可见，后续做单细胞核转录组测序、单细胞 ATAC 测序等相关实验；

 

3、操作超友好：无需复杂仪器，跟着步骤走，新手也能在1小时内完成提核，再也不用熬夜跟组织“死磕”！

 

 

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​二、5 步搞定冷冻组织提核

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第一步：材料“全家福”，提前备齐不慌神

工具类：手剪、镊子、组织研磨仪、水平离心机、细胞计数仪；

试剂类：裂解液、前悬液、后悬液，及添加液；如果要做RNA相关实验，别忘了加RNase抑制剂

耗材类：40μm细胞筛、低吸附枪头、5mL/15mL离心管

 

第二步：组织“碎碎乐”，研磨过滤要细心

向含锆珠的研磨管中加入1mL裂解液，立即放入冷冻组织块（勿解冻），用研磨仪研磨至无块状、呈细腻匀浆。静置2–3分钟后，将匀浆经40μm细胞筛过滤至15mL离心管，以去除组织碎片，便于后续提核。             

 

第三步：离心“分层术”，找准核层是关键

用1mL前悬液冲洗研磨管和细胞筛，把残留的细胞核“冲”进离心管，4℃、500xg离心5分钟，弃上清；用300μL前悬液重悬沉淀，再加入300μL PB1混匀并转移至新管。缓慢沿管底加入600μL PB2，再缓慢加入600μL PB3，确保液层不混合，注意枪头要伸到管底，别让液体混合——这样离心后会形成三层，细胞核就乖乖待在PB2和PB3的交界处！

 

第四步：核层“搬家记”，清洗重悬有技巧

离心结束后，你会看到管里有三层液体：最上面是碎片层，中间薄薄的一层就是核层，最下面是废液。弃除上层约1000μL碎片层，小心吸取中间400μL核层至新管。加入2mL后悬液（核层体积的5倍），轻柔混匀后于4℃、700xg离心5分钟；弃上清，根据后续实验需求，用50-200μL后悬液重悬沉淀以获得所需浓度。

 

第五步：质控“收尾战”，干净核样马上用

用细胞计数仪明场观察，如果还有大于细胞核的碎片，就用10μm细胞筛再滤一次；要是背景干净，直接跳过；质控合格后，细胞核要马上用于后续实验——新鲜的核样才能保证实验结果准确，别放太久哦！

 

 

 

三、注意事项

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1、无菌与低温：全程需无菌操作，所有步骤尽量在湿冰上进行，器材需提前预冷。

2、离心要求：必须使用水平离心机，严格按照步骤设置转速与时间（如纯化步骤 3000×g、20 分钟），避免细胞核丢失或破裂。

3、分层操作：添加 PB2、PB3 时需控制液体流速，保持手部稳定，确保溶液清晰分层，避免核层污染。

4、样本失效：新鲜样本采集后及时保存并快速操作，冻存样本避免反复冻融，解冻后立即使用。

 

 

 

四、数据展示

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如果还有操作疑问，欢迎在评论区留言，我们会一一解答，也别忘了分享给身边需要的科研伙伴，一起高效做实验！

 

 

 

百奥益康试剂盒

 

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BA3333，人骨髓血单个核细胞(BMMC)分离液，100 mL，¥500

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