明星指标：高表达vimentin的巨噬细胞在肝细胞癌免疫抑制中的关键作用

Vimentin (波形蛋白) 是一种在间充质细胞中广泛表达的 III 型中间丝 (intermediate filament, IF) 蛋白。它在细胞骨架的形成、细胞的形状维持、细胞的迁移、细胞信号传导以及细胞应激反应中发挥着重要作用。它通过侧向或末端方式附着于细胞核、内质网和线粒体，参与调控细胞定向运动、取向排列、细胞片层组织形成，并在细胞迁移前沿维持高尔基体极性。此外，波形蛋白通过细胞接触依赖机制保护SCRIB蛋白免受蛋白酶体降解，并促进其定位于中间丝结构

Vimentin结构. Schematic representation of a vimentin filament from a monomer to its assembly into a mature filament. The vimentin monomer is composed of a central a-helical domain flanked by an unstructured head and tail domain. On the central domain, vimentin possesses a rod II domain with lectin-like properties.

重要发现：Vimentin高表达（VIM+）巨噬细胞通过分泌IL-1β激活Treg细胞的免疫抑制功能

复旦大学的王红阳/陈磊教授团队于2024年9月在Nature Cancer （IF：23.5）上发表了题为“Spatial single-cell protein landscape reveals vimentinhigh macrophages as immune-suppressive in the microenvironment of hepatocellular carcinoma”的研究性文章。该文绘制了HCC单细胞空间蛋白图谱，解析了HCC肿瘤间空间异质性，建立了预后相关的干细胞癌（HCC）空间分型（Spatial Pattern），并整合多组学和体外实验揭示了Vimentin高表达的巨噬细胞与Treg细胞的空间互作促进HCC的疾病进展。

该项研究通过开展了单细胞测序和空间转录组分析，揭示了VIM+巨噬细胞的基因表达特征，发现了VIM+巨噬细胞和Treg之间基因表达的高度关联性，提示了VIM+巨噬细胞可能作用于Treg，从而增强免疫抑制。配受体分析进一步揭示了VIM+巨噬细胞或许通过白介素-1β（IL-1β）和干扰素-γ（IFN-γ）参与对Treg细胞的调控。随后，作者利用流式细胞仪分离了VIM+和VIM低表达的巨噬细胞，并检测了其中IL-1β的表达水平。结果表明，在不同类型的巨噬细胞中，VIM+的巨噬细胞显著高表达IL-1β，细胞共培养实验发现了VIM+巨噬细胞促进Treg分泌IL-10，而加入IL-1β抗体可显著缓解作用效果。

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数据验证：

WB免疫印记

WB result of Vimentin Rabbit mAb

Primary antibody: Vimentin Rabbit mAb at 1/500 dilution

Lane 1: Daudi whole cell lysate 20 µg

Lane 2: HeLa whole cell lysate 20 µg

Lane 3: A549 whole cell lysate 20 µg

Negative control: Daudi whole cell lysate

Secondary antibody: Goat Anti-Rabbit IgG, (H+L), HRP conjugated at 1/10000 dilution

Predicted MW: 54 kDa

Observed MW: 57 kDa

IHC 免疫组化

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免疫细胞化学

ICC shows positive staining in HeLa cells. Anti-Vimentin antibody was used at 1/250 dilution (Green) and incubated overnight at 4°C. Goat polyclonal Antibody to Rabbit IgG - H&L (Alexa Fluor® 488) was used as secondary antibody at 1/1000 dilution. The cells were fixed with 4% PFA and permeabilized with 0.1% PBS-Triton X-100. Nuclei were counterstained with DAPI (Blue).Counterstain with tubulin (Red).

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