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技术资料/正文
来自结直肠癌的病人类器官原代培养
54 人阅读发布时间：2025-01-13 14:18
一、操作步骤
1.组织 4℃ 条件下从医院取回。
1.组织 4℃ 条件下从医院取回。
2.消毒取样的 15ml 管，取出组织，放到 10ml 大皿中。
3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡，清洗组织。
4.再用组织缓冲液浸泡、清洗三遍。
5.将组织剪成 1mm3 大小的组织块，转移到 15ml 管中消化。
5.将组织剪成 1mm3 大小的组织块，转移到 15ml 管中消化。
6.在 37℃ 水浴锅中，消化 15min。
7.取少量液体在显微镜下观察，看到较多的单细胞和较少的细胞簇后，终止消化。
8.用 100μm 筛过滤，然后 300g4℃ 离心 5min，移去上清。
9.重悬沉淀，转移到 2ml 离心管中，300g4℃ 离心 5min，移去上清。
10.估算沉淀的细胞量，以 1:25 的比例添加基质胶，重悬。
11.24 孔板铺板，冰上操作，每孔点胶 25ul。
12.铺板后，放到 37℃ 细胞培养箱中 15min 成胶。
13.然后每孔添加 600ul 结直肠癌类器官培养基，放到 37℃ 细胞培养箱中。
二、结果展示
