一、研究背景
所有地球生物均在 1×g 重力下进化,重力对器官形态建成至关重要。
真实或模拟微重力(microgravity)可改变基因表达、酶活性、细胞骨架、有丝分裂及信号转导。
睾丸发育异常直接导致成年后不育,但微重力对胚胎睾丸的作用尚无报道(2015)。
二、研究目的
评估“模拟微重力”环境对离体小鼠胚胎睾丸生长、存活及形态(尤其是睾丸索 testis cords)维持的影响,并与常规 2D 静态培养比较。
三、实验设计
- 动物与取材:孕鼠(CD-1)12.5–16.5 d.p.c.(days post coitum),颈椎脱臼处死后取胚胎睾丸(连带中肾)。
- 三种平行培养(48 h,37 ℃,5 % CO₂)
- ① 2D-agar:琼脂块垫高,气-液界面培养(经典“最佳”对照)。
- ② 2D-immersed:普通培养皿完全浸没(最差对照,易缺氧)。
- ③ 10 mL 旋转反应器,理论重力 0.006×g(模拟微重力)。
- 评价指标
- – 活体测量:睾丸长径 L、短径 W,按椭圆面积 S=π(L/2)(W/2) 计算大小。
- – 组织学:Bouin 固定,石蜡切片 9–10 µm,HE 染色。
- – 睾丸索计数:每张中央纵切片的完整横断面索数。
- – 生殖母细胞(prospermatogonia)计数:2400 µm² 随机视野,区分正常/凋亡形态。
- – 统计:单因素 ANOVA,P<0.05 为显著,P<0.01 为极显著。

四、结论与假设
- 模拟微重力显著改善离体睾丸整体生长与生殖母细胞存活,效果接近“最佳”2D-agar,明显优于常规浸没培养。
- → 原因:细胞回旋仪持续悬浮、低剪切、营养/氧气供应充分。
- 同一微重力条件却导致睾丸索结构破坏:索数锐减、基底膜断裂、排列紊乱。
- → 假设:微重力干扰了 Sertoli-肌样细胞相互作用,下调基底膜关键基因(Wt1、Sox9、Sox8、Col4a1/2、laminin 等)的表达或组装,从而削弱索的完整性。
- 提示“睾丸索维持”对重力/机械力敏感,为后续研究太空生殖发育风险提供新模型。

五、研究意义
- 首次报道地面模拟微重力对哺乳动物胚胎睾丸器官发生的影响(2015)。
- 证实细胞回旋培养仪可作为 3D 睾丸培养平台,兼顾“促进生长”与“模拟失重”双重价值。
- 为深入解析“重力-细胞骨架-基因表达-基底膜-器官形态”连锁机制奠定基础,对未来长期太空飞行中男性生殖健康评估具有前瞻意义。
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