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181 人阅读发布时间:2024-06-17 11:27
蛋白质是生物体中关键的分子,它们在细胞功能和生物过程中发挥着重要的作用。蛋白质之间的相互作用是细胞内部和细胞之间信号传递、代谢调节以及生物反应的基础。因此,对蛋白-蛋白互作的深入研究不仅有助于理解细胞内的生物学机制,还对药物研发和疾病治疗具有重要意义。
在蛋白-蛋白互作研究中,TR-FRET(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer)方法以其独特的优势备受关注。TR-FRET方法具有灵敏度高、背景信号低、稳定性好和操作简单无需洗涤等特点,能够简单快速地检测蛋白-蛋白互作情况。这使得它成为药物筛选以及药物作用机制研究的理想方法。
VKEY-BIO热卖的KeyTec® TR-FRET Tool-Box系列产品提供了灵活开发蛋白-蛋白互作实验的方案,这个系列包含偶联了TR-FRET荧光共振能量转移供体(Solar Eu/Solar Tb)或荧光共振能量转移受体(LA/HX)的标签抗体(如Anti-HIS、Anti-GST等)、二抗(如Anti-Human IgG等)和蛋白(Streptavidin、Protein A等),方便您如“搭积木”一样灵活开发自己的TR-FRET实验。下面是关于KeyTec® TR-FRET Tool-Box系列产品的详细介绍。
产品原理
以带有组氨酸标签(HIS Tag)的蛋白X和生物素化(Biotin)的蛋白Y之间的互作实验模型为例,使用KeyTec® TR-FRET mAb anti-HIS-Solar Eu和KeyTec® TR-FRET Streptavidin-LA两种荧光标记产品。这些荧光标记产品分别与蛋白X和蛋白Y上的标签结合,形成荧光标记的复合物。当蛋白X和蛋白Y相互作用时,带动供体荧光Eu和受体荧光LA靠近,产生能量共振转移(FRET)现象。通过激发供体并检测在665 nm处的特定信号,可以评估蛋白-蛋白互作程度。为了更准确地评估互作程度,建议对数据结果进行归一化处理,可计算Ratio=665 nm/615 nm * 10,000。这类实验模型适合用于筛选蛋白-蛋白互作的抑制剂,如化合物或抗体,通过监测信号强度的变化来评估潜在抑制剂的效果。

产品性能
以PD-1/PD-L1蛋白-蛋白互作模型为例,实验结果表明我们的试剂与竞品相比IC50一致,窗口更大,性价比更高,可平行替换竞品。

产品优势
操作简单:均相反应体系,加样-读数模式,无需洗涤步骤;
低背景值:镧系元素Eu/Tb作为供体荧光,可以排除背景荧光干扰,背景信号值更低;
信号稳定:荧光信号非常稳定,读板时间或筛选规模自由灵活;
适合高通量筛选:支持从96/384孔板直接小型化到高通量筛选模式,如384孔浅孔板和1536孔板。
产品列表
Tool-Box已上市产品列表如下,
√代表已上市;*代表on going

详细列表如下:
