微生物培养的基本操作

1．微生物的培养基
（1）培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养
基质，是进行微生物培养的物质基础。
（2）培养基的分类：
①按照物理性质分类：液体培养基、半固体培养基和固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作
凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可
见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，
固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及
菌种保藏等。
②按照成分培养基分类：人工合成培养基和天然培养基。
合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微
生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工
业生产。
③按照培养基的用途分类：选择培养基和鉴定培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所
需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂
或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。
2．培养基的成分
（1）培养基一般都含水、碳源、氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长
对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
（2）牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供碳源、氮源、维生素等营养物质。
3．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基
①方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板
②倒平板操作的步骤
a．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。
b．右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。
c．用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基
（约 10 ～ 20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。