IDT NGS二代测序DNA文库制备试剂盒 ——基因组DNA文库构建、DNA甲基化文库构建

IDT NGS二代测序DNA文库制备试剂盒
——基因组DNA文库构建、DNA甲基化文库构建

 
北京云肽生物科技代理的美国进口IDT NGS二代测序（下一代测序）DNA文库制备试剂盒，适用于Illumina测序平台，支持基因组双链DNA、cfDNA（循环游离DNA，circulating free DNA）、福尔马林固定或石蜡包埋（FFPE）组织提取的已降解DNA样本的文库构建，以及基于重亚硫酸盐转化的DNA甲基化文库构建。IDT NGS二代测序DNA文库构建试剂盒，所需起始样本量低，建库简单快捷，覆盖均一性好，适用于广泛、复杂的应用。



 
一、IDT xGen DNA Lib Prep EZ 文库制备试剂盒

用于双链DNA的NGS文库构建，样本兼容性好，文库产量高。采用酶切片段法建立文库，通过孵育时间控制DNA片段的切割大小；使用标准TA连接P5和P7接头（Adapter），可选用即用型或定制化的全长接头、短Y接头、特异性Index单标签、Index双标签等；根据接头或样本投入量，可选择是否需要PCR扩增，建库流程灵活；可结合多种Panel杂交捕获探针组，用于靶序列的富集。

IDT xGen DNA Lib Prep EZ 文库试剂盒将DNA片段切割、末端修复、末端添加A、接头连接、磁珠纯化全部纳入一个单管反应，将文库制备时间缩短为大约2小时，节省时间成本。其所需样本量低（1~250ng），偏倚低，可达到均一的序列覆盖。




IDT xGen DNA Lib Prep EZ 文库构建试剂盒适于多种应用，使用宏基因组样本进行试验时，各种投入量下的合成微生物群落表现一致。配合IDT接头、IDT Panel探针组，测序结果覆盖一致，且高度均一。
 


 

 

 

 

 
二、IDT xGEN cfDNA & FFPE DNA 文库制备试剂盒

用于降解严重的低质量DNA样本的文库构建，可在cfDNA循环游离DNA样本或从福尔马林固定或石蜡包埋（FFPE）组织提取的DNA样本中进行灵敏、准确的变异检测，可在≤1%的变异等位基因频率（VAF）下检测变异。采用特殊的连接法，相比传统TA连接法，转化率更高，并抑制接头二聚体形成。在连接接头时加入特异性分子标签（UMI）序列，用于去重和纠错。

 
建库步骤：

1、末端修复——使用末端修复混合酶将cfDNA或剪切过的DNA片段末端补平，以便连接；

2、连接1——使用新型连接酶将连接1接头加到DNA片段3'端，并防止DNA片段相互连接，减少嵌合体形成；连接1接头的3'端包含一个封闭基团，防止接头二聚体形成；

3、连接2——将与分子标签UMI互补的连接2接头作为引物，填补碱基间隙，连接到DNA片段的5'端，形成双链产物；

4、PCR——通过PCR加入Index、P5/P7序列等。



 

 

 

 

 
三、IDT xGen DNA 甲基化文库制备试剂盒

能高效地将重亚硫酸盐转化的单链DNA分子转化为用于表观遗传的研究文库，可用于基因组DNA、福尔马林固定或石蜡包埋FFPE样本提取DNA、cfDNA循环游离DNA、新鲜冷冻组织等，以进行全基因组甲基化测序（WGBS）、基于靶向杂交捕获的简化DNA甲基化测序（RRBS）、基于cfDNA的全基因组甲基化测序、经甲基化DNA免疫沉淀（MeDIP）或染色质免疫沉淀（ChIP）等方式富集的DNA测序等。文库分子复杂度更高、完整性更好、偏倚性更低。



 
采用先重亚硫酸盐转化、后制备文库的策略，尽可能将原始DNA分子转化为文库分子，相较于先建库后转化，IDT xGen DNA 甲基化文库试剂盒的分子复杂度有显著提升。IDT Adaptase技术，在接头连接时不受原始模板DNA序列影响，文库GC偏好性低，能准确还原基因组甲基化比例。实现更完整、偏倚度更低、更类似于WGBS的全面的甲基化基因组覆盖。



 

 

 

 


北京云肽生物科技代理的IDT NGS DNA 文库构建试剂盒