IDT Alt-R™ CRISPR-Cas12a(Cpf1)基因编辑系统工具——crRNA化学定制合成，重组Cas12a核酸酶

IDT Alt-R™ CRISPR-Cas12a(Cpf1)基因编辑系统工具
——crRNA化学定制合成，重组Cas12a核酸酶


北京云肽生物科技代理的进口IDT（Integrated DNA Technologies）Alt-R™ CRISPR-Cas12a（Cpf1）基因编辑系统，提供CRISPR-Cas12a（Cpf1）中crRNA（CRISPR-derived RNA）的化学合成定制服务，并生产商品化通用型重组Cas12a核酸酶（Cas12a nuclease，即Cpf1核酸酶，限制性内切酶，基因组DNA双链剪切）、以及增强RNP（ribonucleoprotein，核糖核蛋白复合体）电转染效率的电穿孔增强剂、增强HDR（Homology directed repair，同源重组修复）概率的HDR增强剂、HDR供体DNA的化学合成服务，提供多重基因组编辑所需全套试剂的工具平台，为因物种基因组富含A、T、DNA靶点不合适而无法使用常规IDT Alt-R™ CRISPR-Cas9系统，提供了更多选择。

IDT Alt-R™ CRISPR-Cas12a（Cpf1）概述

IDT的Alt-R™ CRISPR-Cas12a（Cpf1）系统，对crRNA序列进行优化缩短、化学修饰，对Cas12a（Cpf1）核酸酶结构域进行优化，获得了高保真的双链剪切功能，使用时仅需混合crRNA和Cas12a（Cpf1）核酸酶，再通过电穿孔（如Lonza Nucleofector核转染系统）转染RNP，可进行精确地基因编辑操作。

传统构建CRISPR-Cas12a（Cpf1）质粒的方法，质粒大小高达6-10kb，很难转染，而如使用原代细胞等难转染的细胞，转染效率更低。且质粒不断产生CRISPR-Cas12a，使脱靶率显著增加。IDT转染RNP蛋白复合体的方法，通过优化CRISPR-Cas12a（Cpf1）组件，在提升剪切精确性的基础上，提高转染效率、减少细胞毒性、降低脱靶率，进而提高了基因编辑效率。


IDT Alt-R™ CRISPR-Cas12a（Cpf1）产品


1、Cas12a（Cpf1）核酸酶

Alt-R™ Cas12a（Cpf1）核酸酶，添加核定位序列（Nuclear localization sequence，NLS），经序列优化，提高中靶率，降低脱靶率。V3酶和Ultra酶均可识别TTTV，而Ultra核酸酶增加了对TTTT的PAM（前间区序列邻近基序，protospacer adjacent motif）识别。注：V=A、C、G

 

货号	产品名称	规格	备注
1081068	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 100 µg	100 µg	识别TTTV位点，10 µg/µL，100 µg = 633 pmol
1081069	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 500 µg	500 µg
10001272	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg	100 µg	识别TTTN位点，N表示A、T、C、G碱基
10001273	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg	500 µg
10007804	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg	5 mg
10007922	Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg	100 µg	识别TTTN位点，10 µg/µL，100 µg = 670 pmol
10007923	Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg	500 µg
10007924	Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg	5 mg

2、crRNA（定制）

Alt-R™ Cas12a crRNA，定制合成的crRNA，包含20-24nt的特异性序列（定制）和20nt的通用序列，相比野生型，序列更短，中靶率更高。经化学修饰防止被细胞核糖核酸酶降解。需要与Cas12a（Cpf1）核酸酶结合形成RNP复合体。

货号	产品名称	规格	备注
定制	Alt-R™As Cas12a crRNA，2 nmol	2 nmol	40-45bp，与As.cas12a酶结合使用
定制	Alt-R™As Cas12a crRNA，10 nmol	10 nmol
定制	Alt-R™ L.b. Cas12a crRNA, 2 nmol	2 nmol	40-45bp，与L.b.cas12a酶结合使用
定制	Alt-R™ L.b. Cas12a crRNA, 10 nmol	10 nmol