关于elisa实验问题的解决方法及建议

  由于实验过分严谨，出现一些可控亦或不可控的因素，会对于实验造成一些影响，也会导致一些问题的出现。对于实验中可能出现的一些情况或者问题，我司有一些小小的建议及方案：

 

 

1. 加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低？

①原因：未加入酶标记物。

解决办法：请按照操作步骤进行。

②原因：试剂盒内容物未能充分回。

解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

③原因：室温太低。

解决办法：若室温太低(<19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。

④原因：未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办法： 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

⑤原因：试剂盒已过有效期限。

解决办法：请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳，或是平行性不好？

①原因：温育位置避光不好或受到气流干扰。

解决办法： 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

②原因：操作时间拖太久。

解决办法：请在方法熟练后再进行操作。

③原因：微孔间相互污染。

解决办法： 加样品时，请小心勿溅出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

④原因：标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法：请使用已校正过的移液枪，并确保其与吸头之间有高度密合性。

⑤原因：添加样品或试剂的操作方法不正确。

解决办法：加样品或试剂时，吸头请勿接触微孔。

⑥原因：洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。

解决办法：请随时监控洗板机洗板过程，洗完后立即进行下一步骤。

3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)？

①原因：室温太高(>25℃)。

解决办法： 若无法降低室内温度，请适当缩短步骤4的温育时间。

②原因：底物溶液受到污染。

解决办法： 若发现底物溶液已呈现淡蓝色，请不要再使用。

③原因：反应时间超过太久。

解决办法：请控制反应时间。

④原因：酶标记物污染了盒内其它试剂。

解决办法：使用过的吸头应立即丢弃，可避免试剂间相互污染，凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡，再以清水冲洗干净，可确保无残留)

4. 阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。

①原因：微孔中的试剂未能充分混合。

解决办法： 试剂加完后，需轻敲盘四周使其充分混合均匀。

②原因：洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤.)。

解决办法：请随时监控洗板机洗板过程，洗完后立即进行下一步骤。

③原因：添加样品或酶标记物的量不一致。

解决办法： 请使用已校正过的移液枪，并确保其与吸头之间有高度密合性。