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技术资料/正文
猫（Cat）钩端螺旋体IgG抗体（Lep IgG） ELISA检测试剂盒
139 人阅读发布时间：2023-04-20 18:04
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断
试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被钩端螺旋体（Lep）IgG抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUT OFF值相比较，从而判定标本中钩端螺旋体IgG抗体（Lep IgG）的存在与否。
1. 试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），样品为阴性
4. 阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），样品为阳性
试剂盒性能
猫（Cat）钩端螺旋体IgG抗体（Lep IgG）
ELISA检测试剂盒
使用说明书
检测原理ELISA检测试剂盒
使用说明书
试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被钩端螺旋体（Lep）IgG抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUT OFF值相比较，从而判定标本中钩端螺旋体IgG抗体（Lep IgG）的存在与否。
操作注意事项
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测效果。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 预处理后的样本请按照操作步骤用样本稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测效果。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL；
- 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
- 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
1. 试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），样品为阴性
4. 阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），样品为阳性
试剂盒性能
- 准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。
- 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
- 有效期：6个月
- 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或猫体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
- 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。