菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境

　　要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。目前国际国内常用的菌种保存方法包括：定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、80℃冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。

　　对于不同的保存方式活化的方式也不同：

　　1定期移植法的菌种复苏较简单，直接转接即可；

　　2液体石蜡法保存的菌种在复苏时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上，生长繁殖后，再重新转接一次；

　　3沙土管法保存菌种在复苏时，在无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面；

　　4真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，将安瓿管顶部烧热，用无菌棉签沾冷水，在顶部擦一圈，顶部出现裂纹，用挫刀或镊子颈部轻叩一下，敲下已开裂的安瓿管的顶端，用无菌水或培养液溶解菌块，使用无菌吸管移入新鲜培养基上，进行适温培养；

　　5-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏时，从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止，约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基上进行培养

　　6液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏相似，从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止，一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基上进行培养。

　　总结一下菌种活化需要以下几个步骤：第一配置菌种适宜生长的培养基,第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态，比如将冷冻的菌种解冻,第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养，此步骤称为菌种复壮,第四步挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落,经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的.

　　复苏菌种前应准各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备，所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。启开菌种宜采用锯开法(锯开前用70%酒精棉消毒菌种管外壁)。用吸管将液体培养基0.3ml左右注入被启开的菌种安瓶中并吹打，使安瓶中的冻干菌种溶解成菌悬液。将上述菌悬液全部吸出，分别接种到固体斜面和液体培养管中，一般放置在37℃培养箱培养18~24小时。对需要特殊培养条件的细菌，如需5%~10%CO2或厌氧条件等，应分别于CO2培养箱或厌氧培养箱中培养。次日观察菌种的生长情况，如菌种未生长，应继续培养至72小时。复苏后的菌种在传1~2代后使用。暂不启开的安瓶及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。