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144 人阅读发布时间:2025-07-14 10:25
不吸水链霉菌梧州亚种(Streptomyces ahygroscopicus subsp. wuzhouensis)是中国微生物学家于上世纪80年代在广西梧州土壤中发现的珍贵放线菌资源。该菌株因能高效合成广谱抗真菌活性物质——梧宁霉素(Wuningmycin)而备受关注。梧宁霉素对多种植物病原真菌(如镰刀菌、丝核菌等)具有显著抑制作用,是我国自主研发的重要农用抗生素,已广泛应用于果树腐烂病等植物病害的生物防治领域。
培养基配方
固体培养基(高氏一号改良):
可溶性淀粉 20g,KNO₃ 1g,K₂HPO₄ 0.5g,MgSO₄ 0.5g,NaCl 0.5g,FeSO₄ 0.01g,琼脂 18g,蒸馏水 1L,pH 7.2–7.4。
液体发酵培养基:
葡萄糖 20g,黄豆粉 15g,玉米浆 5g,(NH₄)₂SO₄ 2g,CaCO₃ 4g,蒸馏水 1L,pH 7.0。
培养条件
温度:28±1℃(最适生长与产素温度)
通气:液体发酵需高溶氧(摇床转速 200–220 rpm,装液量 ≤30%)
光照:无需光照,黑暗培养
时间:固体培养 5–7 天产孢;液体发酵 72–96 小时达产素高峰
流程简述
斜面活化(28℃, 7天)→ 孢子悬液制备 → 种子液培养(28℃, 36–48h)→ 发酵罐接种(接种量 5–10%)→ 发酵培养(72–96h)→ 产物提取。
无菌操作:全程严格无菌,避免杂菌污染影响产物纯度。
孢子活性:长期保存菌种需用 20% 甘油 -80℃ 冻存,避免反复传代导致退化。
发酵监控:定期检测 pH(维持 6.8–7.2)、溶氧及菌丝形态,及时调整通气与搅拌。
安全防护:操作时佩戴口罩手套,梧宁霉素虽低毒但仍属生物活性物质。
生长缓慢:相比细菌,放线菌生长周期长,需优化培养基缩短延迟期。
次级代谢调控复杂:梧宁霉素合成受碳氮源、磷酸盐等严格调控,需精准控制营养比例。
溶氧敏感:高密度发酵时易缺氧,导致产物合成受阻,需强化供氧策略。
菌株退化风险:长期传代可能降低产素能力,需建立科学菌种保藏体系。
绿色农药升级:梧宁霉素作为无残留生物农药,符合生态农业趋势,市场潜力巨大。
新型抗生素开发:其独特结构为药物设计提供新模板,有望衍生抗耐药菌新药。
生物刺激素应用:近年研究发现其代谢产物可促进植物根系发育,拓展至生物肥料领域。
合成生物学底盘:基因组挖掘揭示多条次级代谢通路,是活性化合物开发的优质载体。
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