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技术资料/正文

破译阿氏埃希氏菌——从隐形威胁到防控新策略

95 人阅读发布时间:2025-07-08 10:48

一、阿氏埃希氏菌:一个新兴的肠道致病菌

       阿氏埃希氏菌(Escherichia albertii)是一种革兰氏阴性杆菌,隶属于肠杆菌科。尽管与著名的大肠杆菌(E. coli)亲缘关系很近,但阿氏埃希氏菌凭借其独特的生物学特性与致病潜力,近年来已成为医学、食品安全和公共卫生领域备受关注的新兴病原体。

  • 发现与命名: 早期常被误鉴定为大肠杆菌或志贺氏菌。2003年基于基因差异被提议为新种,并于2015年正式命名为 Escherichia albertii,以纪念微生物学家M. L. Albert。

  • 核心特征: 兼性厌氧,具有周生鞭毛(部分菌株),氧化酶阴性,发酵葡萄糖产酸产气(多数)。

  • 致病性: 携带多种毒力因子,如 eae 基因(编码紧密素,介导附着抹平损伤)、cdtB 基因(编码细胞致死性膨胀毒素亚基)以及志贺毒素基因(stx,部分菌株携带)。主要引起人类腹泻(尤其儿童),症状可从水样便到血便不等,严重时可致溶血性尿毒综合征(HUS)。其宿主范围广泛,禽类(尤其鸣禽)是重要天然宿主和潜在传播源。

  • 公共卫生意义: 作为食源性病原体,常通过受污染的禽肉、水或接触病禽传播。其准确诊断的困难导致实际发病率被低估,是食品安全监测和临床诊断中需要加强关注的对象。

二、阿氏埃希氏菌的实验室培养方法

培养环节 推荐方法与条件 关键观察/目标
培养基 麦康凯琼脂 (MAC):首选。37℃培养18-24小时。 典型菌落:深粉色至暗酒红色(发酵乳糖迟缓),光滑、湿润、圆形,直径约1-2mm。
  山梨醇麦康凯琼脂 (SMAC):有助于区分部分菌株。 不发酵山梨醇的菌落呈无色(类似EHEC O157:H7)。
  血琼脂 (BA):35-37℃培养18-24小时。 灰白色、光滑、湿润、不溶血(通常)的菌落。
增菌培养 改良胰蛋白胨大豆肉汤 (mTSB)、脑心浸液肉汤 (BHI) 等。35-37℃震荡培养18-24小时。 增加从复杂样本(如粪便、食品)中分离到目标菌的概率。
纯化与传代 挑取MAC或BA上典型单个菌落,划线接种至新鲜BA或营养琼脂。37℃培养18-24小时。 获得纯培养物。
保存 短期: 营养琼脂斜面,4℃可保存数周。 保持菌种活性。
  长期: 甘油冷冻保存法(推荐)。将纯培养物悬浮于含15-30%灭菌甘油的BHI肉汤或TSB中,-70℃或液氮保存。 菌种保藏首选方法,可保存数年甚至更久。

三、培养阿氏埃希氏菌的注意事项

  1. 生物安全: ⚠️ 阿氏埃希氏菌属于生物安全二级 (BSL-2) 病原体。 所有操作必须在相应级别的生物安全柜中进行。实验人员需穿戴个人防护装备(实验服、手套、护目镜)。严格遵守实验室生物安全规章制度和废弃物处理程序(高压灭菌)。

  2. 无菌操作: 全程严格无菌操作,防止杂菌污染和目的菌外泄。

  3. 菌落特征识别: 熟练掌握其在MAC上的暗酒红色典型特征(区别于大肠杆菌的鲜红色/粉红色和志贺氏菌的无色),是初步鉴别的关键。

  4. 培养时间: 其乳糖发酵能力较弱且迟缓,在MAC上培养需至少18小时才能观察到特征性颜色,有时需延长至48小时观察。

  5. 菌株差异性: 不同来源菌株在生长速度、生化反应上可能存在差异,需结合多种方法鉴定。

四、培养难点分析

  1. 分离困难与杂菌干扰: 在含菌复杂的样本(如粪便、环境样本)中,其数量可能较少,且生长速度通常慢于大肠杆菌等常见菌,易被杂菌掩盖。需依赖选择性培养基(如MAC)和合理的增菌策略。

  2. 误诊率高: 传统生化鉴定(如API 20E)极易将其误判为大肠杆菌(赖氨酸脱羧酶试验常阳性干扰)志贺氏菌哈夫尼亚菌。这是其被长期低估的主要原因。

  3. 毒力因子表达的不稳定性: 体外传代培养可能导致部分毒力相关基因(如 cdtB)丢失或沉默,影响对其致病机制的持续研究。

  4. 标准化培养方案缺乏: 相较于大肠杆菌,针对阿氏埃希氏菌优化的、广泛认可的标准化分离培养方案仍在完善中。

五、广阔的应用前景

  1. 精准诊断与监测: 开发特异性强、灵敏度高的分子检测方法(如针对uidA变异位点、多重PCR检测毒力基因) 和血清学/免疫学方法,提升临床和食源性感染的诊断准确率,为流行病学调查和精准防控提供依据。

  2. 致病机制深入解析: 研究其独特的附着/侵袭机制、毒素作用机理、免疫逃逸策略以及与宿主(特别是禽类)相互作用的分子基础,为开发新型抗感染疗法和干预措施提供靶点。

  3. 耐药性监测与防控: 监测其耐药谱变化,研究耐药基因的获得与传播机制,指导临床合理用药和公共卫生策略制定。

  4. 疫苗研发(潜力方向): 基于对其关键毒力因子和保护性抗原的研究,探索开发预防禽类感染或阻断人畜共传播的疫苗。

  5. 新型抗菌药物/抗毒力策略筛选模型: 利用纯培养物或细胞感染模型,筛选能抑制其黏附、侵袭或毒素活性的新型化合物或生物制剂。

  6. 环境与食品安全控制: 优化食品加工链(特别是禽肉制品)和环境中的检测方法,评估消毒措施有效性,降低污染风险。

资料格式:

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