Caco-2 人结直肠腺癌细胞的培养与保藏指南

Caco-2 细胞系是一种常用的人结直肠腺癌细胞模型，广泛应用于药物吸收、代谢和毒性研究。智立中特生物为您提供全面的 Caco-2 细胞培养和保藏解决方案，确保您获得高质量的细胞样本和可靠的实验结果。

一、Caco-2 细胞培养

1. 培养基和试剂

• 基础培养基: Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)，高糖

• 补充剂: 10% 胎牛血清 (FBS)，1% 非必需氨基酸 (NEAA)，1% 青霉素-链霉素 (Pen-Strep)

• 其他试剂: 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，PBS 缓冲液

2. 培养条件

• 温度: 37°C

• CO2 浓度: 5%

• 湿度: 95%

3. 细胞传代

• 当细胞融合度达到 80-90% 时进行传代。

• 吸除旧培养基，用 PBS 缓冲液轻柔洗涤细胞两次。

• 加入适量胰蛋白酶-EDTA 溶液，37°C 孵育 2-3 分钟，直至细胞变圆脱落。

• 加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打细胞至单细胞悬液。

• 将细胞悬液按 1:3 至 1:6 的比例接种到新的培养瓶中，补充新鲜培养基。

4. 细胞冻存

• 选择对数生长期的细胞进行冻存。

• 按照细胞传代的方法收集细胞，离心后重悬于冻存液中（90% FBS + 10% DMSO）。

• 将细胞悬液分装到冻存管中，标注细胞名称、代次、冻存日期等信息。

• 采用程序降温法冻存细胞：4°C 30 分钟，-20°C 2 小时，-80°C 过夜，最后转入液氮中长期保存。

二、Caco-2 细胞保藏

• 液氮保藏: 液氮保藏是长期保存细胞的最佳方法，可保存数十年。

• -80°C 保藏: -80°C 保藏可作为短期保存方法，建议保存时间不超过 6 个月。

三、注意事项

• 所有操作需在无菌条件下进行，避免细胞污染。

• 定期更换培养基，保持细胞良好的生长状态。

• 冻存细胞时，应使用高质量的冻存液，并严格控制冻存程序。

• 复苏细胞时，应快速解冻，并立即加入预热的培养基中。

四、智立中特生物的优势

• 高质量的细胞株: 我们提供经过严格质量控制的 Caco-2 细胞株，确保细胞的纯度和活力。

• 完善的培养体系: 我们提供优化的培养基和培养条件，确保细胞的最佳生长状态。

• 专业的保藏服务: 我们提供液氮保藏和 -80°C 保藏服务，确保细胞的安全和稳定。

• 全面的技术支持: 我们提供专业的技术支持和售后服务，解决您在细胞培养和保藏过程中遇到的各种问题。