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    王静

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    细胞库 / 细胞培养、试剂、抗体、技术服务

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还在为选培养基发愁?这篇帮你搞定!

254 人阅读发布时间:2025-02-17 16:58

  在细胞培养过程中,选择合适的培养基至关重要。细胞培养基是为细胞提供营养物质、维持细胞的生理状态和支持细胞增殖的基本溶液。常见的培养基类型包括经典/基础培养基、血清、无血清培养基以及化学成分确定的培养基等。其中,经典/基础培养基包括RPMI-1640、MEM、DMEM/F12、McCoy's5A和IMDM、M-199、Ham'sF-12等。通过了解这些培养基的特点,您可以为您的细胞选择合适的培养基,确保实验的顺利进行。

  1、RPMI-1640Medium

  RPMI-1640是由Moor等研究成功的,最初为培养小鼠白血病细胞的需要而制备,后经几次改良从RPMI1630、1634,而至RPMI1640。RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

  2、MinimumEssentialMedium(MEM)

  MEM是由Harry Eagle在1959年通过对早期培养基的优化,开发了这种成分更简单、更经济的培养基,也称最低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。

  3、DMEM-高糖(标准型)

  是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

  4、DMEM-低糖(标准型)

  是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。

  5、DMEM/F12

  DMEM/F12是由Renato Dulbecco、Richard G.Ham等研发,DMEM/F12是将DMEM和F12两种培养基按一定比例混合而成的,结合了两种培养基的优点,能支持更广泛的细胞类型的生长,特别适用于对营养需求较高的细胞或难以培养的细胞。

  DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。

  6、McCoy's5A

  McCoy's5AMedium是由Robert E.McCoy研发,主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。

  7、Iscove'sModifiedDulbeccoMedium(IMDM)

  Guilber和Iscove将Dulbecco's Medium改良为Iscove'sMedium,用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。

  8、M-199Medium

  1950年,Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液,即M-199,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。

  Ham'sF-12培养基

  可以在加入很少血清的情况下应用,特别适合单细胞培养和克隆化培养,是无血清培养中常用的基础培养液。

  上述为大家介绍常见的细胞培养基类型及适应范围,那么,如何才能选择培养基?选择合适的细胞培养基是细胞培养实验成功的关键。以下介绍三种常用的方法:

  1、咨询细胞来源:您可以向细胞株的厂家咨询推荐的培养基,或者在引种来源的细胞库中查找该细胞株的培养信息。细胞库通常会提供推荐的培养基、培养条件以及相关的文献资料等。

  2、根据细胞特点和实验需要:您可以根据细胞类型、实验目的以及是否需要添加血清等因素选择合适的培养基。例如,某些细胞需要特定的生长因子才能生长,而一些实验可能需要使用无血清培养基以减少实验变异。

  3、自行试验:您可以用多种培养基培养细胞,并绘制生长曲线,记录细胞的生长速度,观察细胞的形态变化,根据实验结果选择最佳培养基。在进行试验时,建议设置对照组,并使用显微镜等工具观察细胞形态。

  选择合适的培养基是细胞培养实验成功的基石。通过了解不同类型培养基的特点,并结合细胞类型和实验目的进行选择,科研人员可以优化实验条件,提高实验结果的可靠性和可重复性。希望本文能为您的细胞培养实验提供一些参考,祝您实验顺利,成果丰硕!

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