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1883 人阅读发布时间:2025-02-14 13:16
不同菌种的复苏、保存和活化方法因菌种特性而异,以下是一些常见方法:
1.复苏
复苏是将冷冻或干燥保存的菌种恢复到活性状态的过程。
冷冻保存菌种:
从-80°C冰箱或液氮中取出冻存管。
快速解冻(通常37°C水浴)。
解冻后立即接种至适宜培养基,置于合适温度培养。
冻干菌种:
打开冻干管,加入适量无菌液体培养基。
静置片刻,待菌种溶解后接种至培养基,置于合适温度培养。
2.保存
保存是为了长期维持菌种活性。
冷冻保存:
将菌种与保护剂(如甘油)混合,分装至冻存管。
置于-80°C冰箱或液氮中长期保存。
冻干保存:
将菌悬液与保护剂混合,分装至冻干管。
使用冻干机去除水分,真空密封保存。
斜面或半固体保存:
将菌种接种至斜面或半固体培养基,培养后密封,4°C保存,定期转接。
3.活化
活化是使保存的菌种恢复最佳生长状态。
转接培养:
将保存的菌种接种至新鲜培养基,置于适宜温度培养。
根据菌种特性选择培养基和培养条件。
液体培养:
将菌种接种至液体培养基,摇床培养以增加氧气供应,促进生长。
4.注意事项
无菌操作:避免污染。
适宜条件:根据菌种选择合适培养基、温度和气体环境。
定期检查:保存期间定期检查菌种活性,必要时重新保存。
5.常见菌种的处理
细菌:常用LB培养基,37°C培养。
酵母:常用YPD培养基,28-30°C培养。
霉菌:常用PDA培养基,25-28°C培养。
总结
不同菌种的复苏、保存和活化方法各有差异,需根据菌种特性选择合适条件,并严格无菌操作。
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