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254 人阅读发布时间:2025-02-11 10:03
厌氧菌在有氧的环境下无法生长,因此培养厌氧菌需要创造一个无氧的环境。通常可以通过在培养基中加入还原剂,或者使用物理和化学方法去除环境中的游离氧来实现。以下是一些常用的厌氧培养方法:
厌氧缸法
将接种好的标本放入厌氧缸内进行培养。厌氧缸是一个普通的干燥缸,通过物理化学方法使其内部造成厌氧环境,从而培养厌氧菌。
厌氧袋(Bio-bag)
在塑料袋内创造厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明且不透气,内装气体发生管(含有硼酸化钠的碳酸氢钠固体和5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管和干燥剂。将已接种好的平板放入袋内,尽量挤出空气后密封袋口。先折断气体发生管,再折断美兰指示剂管,使袋内在半小时内造成无气环境。如果指示剂不变色,表示袋内已达厌氧状态,可以进行孵育。
厌氧手套箱(Anaerobic glove box)
这是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作。箱侧有一个交换室,具有内外两门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,利用充气中的氢在钯的催化下和箱中残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落。这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究。
厌氧盒
原理同厌氧袋,有成品销售。
生物耗氧法
在一密闭的容器内放入生物(多为植物),消耗氧气,同时产生二氧化碳,供细菌生长用。
焦性末食子酸法
在洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液。将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的白蜡封边,造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,简单。如有梭状芽孢杆菌。
疱肉培养基
本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。
通过这些方法,你可以为厌氧菌创造一个适宜的生长环境,并进行相关的培养和实验操作。
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