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317 人阅读发布时间:2025-02-08 13:05
菌种保藏的目的是为了保存优良的微生物菌种,使其在适宜的环境条件下保持活力,避免突变和污染。以下是几种常用的菌种保藏方法:
1️⃣定期移植保藏法
将菌种接种在斜面或液体培养基上,待其生长至健壮状态后,放入4℃冰箱保藏。每隔一定时间需重新移植培养一次,如芽孢杆菌每3~6个月移种一次,其他细菌每月移种一次。
2️⃣液体石蜡保藏法
在生长良好的斜面表面覆盖一层无菌的液体石蜡,液面高出培养基1cm,然后将其置试管架上以直立状态低温保藏。此方法是定期保藏法的补充。
3️⃣沙管保藏法、土壤保藏法
这两种方法适用于特定菌种的保藏。
4️⃣麸皮保藏法
将麸皮或其他谷物与培养基成分按一定比例拌匀,高温灭菌后接入菌种孢子液,适宜温度下培养至长出菌丝,再干燥后低温保藏。常用于放线菌和霉菌的保藏。
5️⃣蒸馏水保藏法
每个试管中装5mL灭菌的无菌水,用接种针从斜面或平板上挑取一环菌种细胞,接入蒸馏水中并使之悬浮,试管用无菌的橡皮塞塞紧,放置10℃低温保藏。
6️⃣冷冻干燥保藏法
将菌液在冻结状态下升华其中水分,最后获得干燥的菌种样品。此方法是目前被广泛推崇的方法。
7️⃣液态超低温保藏法
将菌种悬浮封存于圆底安瓿管或塑料的液氮保存管内,放到-196℃~-150℃的液氮罐或液氮水箱内保藏。此法已被公认为当前最有效的菌种长期保存技术之一。
8️⃣甘油保藏法
菌种悬浮在10%(体积分数)甘油蒸馏水中,置低温(-80~70℃)保藏。实际中,常将待保藏菌培养至对数期的培养液直接加到已灭过菌的甘油中,并使甘油的终浓度在10%~30%左右,再分装于小离心管中,置低温保藏。基因工程常用此法保藏。
选择合适的保藏方法可以确保微生物菌种的长期活力和稳定性。
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