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216 人阅读发布时间:2024-12-27 15:26
细胞培养
要说最令科研人头疼的事情,莫过于培养细胞了。细胞培养是每一个细胞人的必修课,指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。这是一个看似简单,实际上常常让人头疼的一个过程,比如本该贴壁的细胞不贴壁,希望它悬浮却悄悄聚团了,甚至一不小心细胞就死了……
想要轻松地培养细胞,细胞培养耗材必不可少。常用的细胞培养耗材有三种,细胞培养瓶、细胞培养板和细胞培养皿,那我们应该如何选择呢?
1.细胞培养瓶
细胞培养瓶是实验室进行长时间细胞培养、大量细胞扩增和防污染的最适合培养器皿。常用的体积规格有25cm2、75cm2、175cm2、225cm2。盖子有透气盖和密封盖两种,根据细胞对氧气的需求程度来选择即可。
优点:
细胞不易污染,常用于长时间连续传代或者贵重细胞的培养
适合大量扩增
闭口瓶适合转移
缺点:
操作相对不方便
瓶口和瓶底的气体浓度有差异
2.细胞培养皿
细胞培养皿根据底面积大小可分为35mm,60mm,100mm等。细胞培养皿一般适合临时培养,不管是换液、传代、还是收获细胞,操作都比较方便。
优点:
成本较低
容器口径大,操作方便
适合较短时间培养的细胞
缺点:大量或者长时间培养容易出现污染
3.细胞培养板
细胞培养板常见规格有6孔、12孔、24孔、48孔、96孔和384孔等。根据底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型)。贴壁细胞一般用平底培养板;悬浮型细胞的培养一般用V型;U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞;V型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。圆底的通常拿来做分析,化学反应,或是保存样品用。
优点:
适合做对照分析实验
孔之间的均一性高
规格多样,有多种孔数和底部类型可供选择
适合高通量筛选或者单克隆挑选
缺点:
大量或者长时间培养容易出现污染
培养瓶和培养皿的区别在于安全系数的高低和培养细胞数量的多少。以细胞为载体或者对象的实验用培养皿比较好,因为用的量比较少,节约细胞,且比较方便做对照实验。但培养皿开口较大,相对更容易污染。
组织块原代培养或容易被污染的细胞培养时用培养瓶,长出的细胞传代后就可以依个人喜好而定。细胞培养瓶的面积较大,需要大量扩增细胞的时候通常使用培养瓶。
细胞培养瓶和培养皿都是实验室里面用于微生物或细胞培养的容器,具体选用哪种要根据实验的具体需求而定,还要考虑到细胞的培养方式,是悬浮培养还是贴壁培养。
合适的细胞培养耗材是保证细胞良好生长的前提,也是加快实验进程、确保培养效果的关键。在选择时要结合细胞培养方式、培养规模、实验室条件等因素综合考虑。
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