上海晶风生物科技有限公司
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技术资料/正文
人加德纳菌抗体IgG（GV IgG）试剂盒说明书
181 人阅读发布时间：2021-09-10 08:42
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中加德纳菌抗体IgG（GV IgG）表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人加德纳菌抗体IgG（GV IgG）表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中加德纳菌抗体IgG（GV IgG）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人加德纳菌抗体IgG（GV IgG）的存在与否。
操作步骤
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中加德纳菌抗体IgG（GV IgG）表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人加德纳菌抗体IgG（GV IgG）表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中加德纳菌抗体IgG（GV IgG）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人加德纳菌抗体IgG（GV IgG）的存在与否。
操作步骤
- 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
- 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
- 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
- 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
- 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
- 温育：操作同3。
- 洗涤：操作同5。
- 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
- 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
- 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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