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上海梵态生物科技有限公司
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上海梵态生物科技有限公司
入驻年限：6 年
- 联系人：
付志泉
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上海 奉贤区
- 业务范围：
原辅料包材、试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材、实验室仪器 / 设备
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技术资料/正文
鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书
79 人阅读发布时间：2020-12-02 12:24
鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）的含量。
实验原理：
本试剂盒应用间接法测定标本中鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）水平。用纯化的鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）捕获抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）含量。
操作步骤
注意事项：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。
检测范围：
5 ng/mL - 160 ng/mL
灵敏度：
最低检测浓度小于1.0 ng/mL
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存： 2-8℃。
2．有效期： 6个月
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）的含量。
实验原理：
本试剂盒应用间接法测定标本中鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）水平。用纯化的鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）捕获抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡传染性支气管炎病毒抗体（IBV Ab）含量。
操作步骤
- 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
- 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
- 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
- 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
- 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
- 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
- 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
- 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
- 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
- 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
- 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
- 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
- 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
- 底物请避光保存。
- 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
- 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
- 本试剂不同批号组分不得混用。
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。
检测范围：
5 ng/mL - 160 ng/mL
灵敏度：
最低检测浓度小于1.0 ng/mL
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存： 2-8℃。
2．有效期： 6个月