神经组织和其他可兴奋组织一样,在接受一次刺激产生兴奋以后,其兴奋性将会发生规律性的变化,依次经过**不应期、相对不应期、超常期和低常期,然后再回到正常的兴奋水平。为了测定神经发生一次兴奋后兴奋性的变化,采用双脉冲刺激。可先给予一个中等强度的阈上刺激,在神经发生兴奋后,按不同时间间隔给予*二个刺激。以*二个刺激是否引起动作电位以及幅度的改变来测定神经兴奋性变化规律,测出神经干的不应期。
接下来我们将用蟾蜍或蛙为实验对象,通过ZL-620U医学信号采集处理系统、蛙类手术器械、标本屏蔽盒、带电极的接线若干、林格液等实验器材,了解蛙类坐骨神经干动作电位发生后,神经干自身兴奋性的规律的变化。
【方法和步骤】
1.制备蟾蜍坐骨神经干标本
- 方法一:标本制备方法与坐骨神经腓肠肌标本制备方法大体相同。应注意:1)神经干应尽可能分离得长一些。要求上自脊椎附近的主干,下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近为止;2)神经干分离过程中切勿损伤神经组织,以免影响实验效果;3)神经两端要用细线扎住,然后浸于林格液中备用。
- 方法二:取剥皮后的蟾蜍下部躯干,取俯卧位,用尖头镊夹住骶骨尾端稍向上提,用组织剪水平剪除骶骨。然后将标本仰卧,用玻璃分针分离脊柱两侧坐骨神经干,穿线,紧靠脊柱分别结扎神经,并剪断神经,提起线头,从骶骨剪口处穿向背侧,将标本俯卧,用大头针将标本成“人”字形固定。用手轻提一侧结扎神经的线头,辨清坐骨神经走向,然后置剪刀于神经与组织间,剪刀与下肢成30°角,紧贴股骨、腘窝,顺神经走向把神经连同肌肉一起剪下,直至跟腱,剪断跟腱和神经。提起剪下的神经肌肉标本,用镊子夹住腓肠肌表面,顺神经干向轻拉,去掉肌肉组织后,一根坐骨神经干标本便制备好了。
2.连接实验装置。点击ZL-620U菜单“实验/常用生理学实验”,选择“神经干动作电位不应期的测定”,设置ZL-620U放大器、采样和刺激器参数(表1),刺激模式也可以采用主周期刺激的刺激,脉冲数设为2。
3.实验观察
给予神经干*大刺激强度,逐步改变刺激间隔时间,随着双脉冲时间间隔的缩短,逐渐缩短两个刺激方波之间的间隔,可见*二个动作电位向*一个动作电位逐渐靠近,当*二个动作电位幅值开始减小时,记下刺激间隔(T2);继续缩短刺激间隔直到*二个动作电位消失,记下此时的刺激间隔(T1)。动作电位开始至T1**不应期,T1至T2大致为相对不应期。
【实验结果】
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- 将观察到的结果打印输出或描画于报告上。
- 标出神经干动作电位不应期。
【思考题】
在接受一次刺激产生兴奋以后,神经干为什么会出现不应期?

资料格式:
神经兴奋不应期——ZL-620U医学信号采集处理系统的测定.pdf
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