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ATCC细胞无菌操作注意事项

人阅读 发布时间:2021-01-20 14:18

1.玻璃器皿的消毒和清洁

新购玻璃器皿的处理新购玻璃器皿应用热番笕水洗刷,流水冲刷,再用1%~2%盐酸溶液浸泡,以除去游离碱,再用水冲刷。对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等,经清水洗净后应注入浓盐酸少量,渐渐滚动,使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸,再用水冲刷。

 

2.污染玻璃器皿的处理

①一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分钟,亦可用番笕或合成洗涤剂洗刷使尽量发生泡沫,然后用清水冲刷至无番笕停止。然后用少量蒸馏水冲刷。

 

②细菌培育用的试管和培育皿可先行集中,用1kg/cm2高压灭菌15~30分钟,再用热水洗涤后,用番笕洗刷,流水冲刷。

 

③吸管运用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时,逐支用流水重复冲刷,再用蒸馏水冲刷。

 

④油蜡沾污的器皿,应独自灭菌洗涤,先将沾有油污的物质弃去,倒置于吸水纸上,100℃烘干半小时,再用碱水煮沸,番笕洗涤,流水冲刷。必要时可用二jia苯祛污。

 

⑤染料沾污的器皿,可先用水冲刷,后用清洁或稀盐酸洗脱染料,再用清水冲刷。一般染色剂呈碱性,所以不宜用番笕的碱水洗涤。

 

⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡,取出后流水冲刷,再用番笕或弱碱性煮沸,自然冷却后,流水冲刷。被结核杆菌污染或不易洗净的玻片,可置于清洁液内浸泡后再冲刷。

 

3.无菌器材和液体的预备

将玻璃用具中的培育皿、培育瓶、试管、吸管等按上述办法洗净烘干后,用一洁净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花,装入干净的铝盒或铁盒中,于120℃的干燥箱中干燥灭菌2小时,取出备用。关于手术器械、瓶塞、作业服以及新制造的PBS洗液,则选用高压蒸气灭菌法,即在15磅的条件下,加热20分钟。而关于MEM培育液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后运用。

 

4.在无菌操作过程中,重要的是要坚持作业区的无菌、清洁。

 

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