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人Elisa试剂盒实验原理与特点

人阅读 发布时间:2020-11-11 13:21

人Elisa试剂盒试验原理:

试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。

人Elisa试剂盒试剂盒成分:

1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T

2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1

3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2

4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1

5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1

6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1

7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1

8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)

人Elisa试剂盒性能:

1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900

2. 灵敏度:zui低检测浓度小于(参考说明书)

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%

5. 贮藏:2-8,避光防潮保存。

6. 有效期:6个月。


人Elisa试剂盒优点:

1.特异性强:不与其它细胞因子反应。

2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%

3.稳定性高:实验效果很稳定。

4.超灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990

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