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上海碧云天生物技术股份有限公司品牌商
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品牌商
上海碧云天生物技术股份有限公司
入驻年限：7 年
- 联系人：
碧云天
- 所在地区：
上海 松江区
- 业务范围：
试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材、实验室仪器 / 设备、论文服务
- 经营模式：
生产厂商
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公司新闻/正文
适配全血清型的AAV纯化试剂盒来啦
329 人阅读发布时间：2025-05-15 10:30
使用碧云天生产的AAV Purification Kit Mini For All Serotypes (C2906)纯化的AAV9-CRE-GFP感染Loxp-STOP-loxp-mCherry HeLa Cells (C7998)的效果图：
为什么选择AAV？
AAV感染细胞后通常不会与基因组DNA重组，但可以长期稳定地表达目的蛋白，特别是可以在很多不分裂的细胞中长期稳定表达。AAV还具有滴度高，体内注射不产生明显的免疫反应，对于增殖和非增殖细胞感染效率高等优点。
AAV的纯化方法有哪些？
获得高纯度的病毒是稳定感染的前提，常见的获得AAV的方法包括密度梯度超速离心法和色谱纯化法等。密度梯度超速离心法通常存在回收效率低、成本高、处理时间长、操作复杂、样品损失大等缺点；色谱纯化法则需要大量的血清型特异性优化，成本较高，极大限制了高活性、高纯度AAV的制备。
碧云天推出AAV Purification Kit Mini For All Serotypes(全血清型腺相关病毒小量纯化试剂盒)，可在6小时内实现从约30ml细胞和培养上清液中获得高活性、高纯度、高回收率的腺相关病毒。与传统的密度梯度超速离心法和色谱纯化法相比，不仅避免了反复冻融和超声破碎等繁琐耗时的操作，同时也极大保留了AAV的生物学活性。
产品特点：
浓缩效率高，纯化效果好：有效去除细胞碎片及基因组DNA的污染，病毒浓度可提高10-100倍，同时保留了生物活性，具有优秀的感染效果；
操作简单，纯化时间短：无需使用超高速离心机，在6小时内即可完成纯化，可直接用于后续的病毒感染及AAV基因表达效果的检测和评估；
组分齐全、使用便捷：包含提取AAV所需的除氯.仿以外的全套试剂，用户可直接使用或只需简单混合即可使用；
适用范围广：AAV目前发现主要有12种血清型(AAV1-AAV12),本试剂盒均适用。
产品效果：
图1.使用碧云天生产的AAV Purification Kit Mini For All Serotypes(C2906)纯化的AAV9-CRE-GFP的SDS-PAGE电泳效果图。
常见问题分析：
1、纯化后病毒得率较低：
a.切勿使用经过反复冻融后的病毒液进行纯化，这会严重影响病毒的得率。
b.包装后过早收集病毒，病毒产量较低。建议包装后3-5天进行病毒收集。
c.病毒总体积小于或等于30ml时，请使用0.5ml的超滤管；病毒总体积为90-120ml时，请使用15ml的超滤管，以减少吸附损失。
2、纯化后病毒纯度较低：
a.本产品的纯化对象中禁止含有血清，建议包装病毒时使用不含血清的培养基，或至少在纯化前一天更换为无血清培养基或OptiPRO™ SFM。如果培养液中含有血清，则在纯化时应去除上清，但会导致病毒得率下降。
b.细胞沉淀和培养上清液使用量过多，导致纯化不完全。请按照说明书推荐用量进行纯化。
