线粒体是细胞的能量工厂，是细胞内氧化还原反应的主要场所，其结构和功能异常可导致多种疾病的发生。目前，已发现人类100多种疾病与线粒体基因(mitochondrial DNA, mtDNA)突变有关，如Leber遗传性视神经病、mtDNA突变与氨基糖苷类抗生素致聋(又称“一针致聋”)、MELAS综合征、MERRF综合征、Kearns-Sayre综合征等。线粒体突变检测可辅助线粒体遗传病的早期诊断，可明确病症，对病人良好预后十分重要；此外，线粒体突变检测可以有效预防“一针致聋”的发生。因此人线粒体DNA突变检测及其研究非常重要。
 

一站式稳定、高效建库—BeyoNGS™人线粒体DNA突变检测试剂

碧云天生产的BeyoNGS™人线粒体DNA突变检测试剂盒(For Illumina)是一种用于人类线粒体DNA (Human mitochondrial DNA, hmtDNA)全基因长度进行基因分型检测的高通量测序文库构建试剂盒。该剂盒包含了用于线粒体突变检测的多重PCR扩增的引物和试剂、用于去除多余引物的Primer Cleanup Mix，以及对每个样品进行标签PCR反应所需相关试剂。能够实现一站式稳定、高效地获得适用于Illumina测序平台的mtDNA扩增子测序文库，最终获得全长人线粒体DNA的突变信息。

图1. BeyoNGS™人线粒体DNA突变检测试剂盒(For Illumina) (D9501)的建库流程图。带有通用标签的目标区域扩增引物与线粒体基因组DNA结合，通过多重PCR反应对线粒体基因组DNA进行全序列多片段扩增，同一样品的扩增产物混合后经Primer Cleanup Mix酶解、1:100倍稀释，再使用BeyoNGS™ Bidirect Amp Dual-Index Primers (For Illumina)标签引物进行第二轮正链和负链的标签扩增反应给样品添加上测序标签，最后经磁珠纯化后完成测序文库构建。
 

选购指南：
BeyoNGS™人线粒体DNA突变检测试剂盒(For Illumina)分为不同大小的2种包装，具有384孔PCR仪的用户，可分别用于8个和96个样品的mtDNA全长扩增子测序文库的构建。对于使用PCR管或96孔PCR体系的用户，建议将第一次多重PCR反应体积增加一倍至10μl，可有效降低因体积损耗所导致的扩增失败率。