糖基化修饰作为一种蛋白质翻译后修饰( PTM)，几乎存在于所有生物体中，包括真核生物、真细菌和古细菌。糖基化修饰的多样性会改变蛋白的质量和电荷，在细胞中起着至关重要的作用，包括蛋白质折叠、转运和稳定性的调控，以及细胞生长、细胞-细胞通讯、细胞-基质相互作用、病毒复制和免疫应答等各种生物学过程的调节。异常的蛋白质糖基化修饰通常与许多疾病的病理进展有关，如癌症、神经退行性疾病、肺部疾病、血液疾病和遗传病等。新的研究表明，核酸也存在糖基化修饰。
 

去除N-糖基化修饰需要几小时甚至过夜，严重拖慢了实验流程。碧云天研发生产的Rapid PNGase F去糖基化试剂盒(变性法/非变性法)（P2541/P2543），是一种高效快速去糖基化试剂盒，可在天然或变性条件下从糖蛋白或糖多肽中切割N-糖苷键，从而去除N-聚糖链，切割位点如图1所示。仅需50ºC孵育10分钟即可完成对糖蛋白N-聚糖链的去除，可有效缩短样品处理时间。处理后的样品可用于SDS-PAGE、Western、高效液相色谱(HPLC)或质谱分析等。本试剂盒也可以间接用于抗体、免疫球蛋白融合蛋白或其它糖蛋白的糖基化水平检测。

图1.碧云天Rapid PNGase F去糖基化试剂盒(变性法/非变性法) (P2541/P2543)移除N-糖苷示意图。

 

产品用途：
1.抗体、免疫球蛋白融合蛋白或其它糖蛋白的体外去N-糖基化修饰
2.检测表征蛋白是否存在N-糖基化修饰。
 

产品特点：
●   适用范围广：可在天然或变性条件下从糖蛋白或糖多肽中切割N-糖苷键；
●   可切割几乎所有类型的N-多糖：糖基肽酶F可以在几乎所有类型的N-多糖如高甘露糖、混合型和复杂寡聚糖的最内端N-乙酰葡萄糖胺和天冬酰胺残基的连接处切割，从而去除N-聚糖链。可用于抗体、免疫球蛋白融合蛋白或其它糖蛋白的体外去除N-糖基化修饰反应；
●   使用便捷：该试剂盒提供的PNGase F的N端带有His-tag，可以通过相应的His抗体琼脂糖凝胶、磁珠或镍柱吸附去除。
 

产品效果：
体外酶解去糖基化修饰反应根据对糖蛋白或糖肽的处理方式不同，可分为变性去糖基化修饰反应和非变性去糖基化修饰反应。
●   变性去糖基化修饰反应：蛋白质变性导致三级结构被破坏， 内部序列暴露可以去除所有糖基化修饰；
●   非变性去糖基化修饰反应：蛋白原始构象被保留，三级结构中暴露在外的糖苷被移除，但是处于内部的糖苷被保留， 蛋白的酶活性或抗原性很可能不受影响。本试剂盒去除变性和非变性蛋白的N-糖基化修饰的效果如图2，图3所示，用户可根据实验目的选择相应的去糖基化修饰反应。

图2.Rapid PNGase F去糖基化试剂盒(变性法) (P2541)去除不同种属IgG的N-糖基化修饰效果图。

图3.Rapid PNGase F去糖基化试剂盒(非变性法) (P2543)去除不同种属IgG的N-糖基化修饰效果图。

除此之外我们还有基础款的PNGase F去糖基化试剂盒（P2318），可在天然或变性条件下从糖蛋白或糖多肽中切割N-糖苷键，从而去除N-聚糖链。产品这么给力，快点用起来吧！