品牌商
上海碧云天生物技术股份有限公司
入驻年限：6 年
- 联系人：
碧云天
- 所在地区：
上海 松江区
- 业务范围：
试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材、实验室仪器 / 设备、论文服务
- 经营模式：
生产厂商
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免疫染色技术讲堂(1) -5
人阅读 发布时间：2020-10-16 09:31
五. 蛋白检测
对于免疫荧光染色，二抗孵育完成后就可以直接在荧光显微镜下观察；对于非免疫荧光染色，可以根据二抗标记物类型选择对应的显色方法。目前较为常用的二抗为HRP标记二抗，对应的显色底物则常用DAB。DAB与HRP反应会形成棕色的沉淀物，随着反应时间延长，颜色会逐渐加深，因此显色时需要在显微镜下配合观察，及时终止染色反应。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P0202 | DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒 | 共20ml | 81.00元 |
| P0203 | DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒 | 共100ml | 233.00元 |
| P0211 | TMB显色液(组化或膜HRP显色用) | 100ml | 243.00元 |
| C3206 | BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒 | 共100ml | 237.00元 |
显色后，我们通常还会对组织/细胞进行复染，复染的目的是为了形成细胞轮廓，从而更好地对待测蛋白进行定位。对于免疫荧光染色，我们通常采用DAPI对细胞核进行复染；对于非免疫荧光染色，则通常选用HE染色进行复染
如果是免疫荧光染色，通常还可以进行多重荧光染色。但对于DAB显色等方式则不适合再进行多重染色。
多重荧光染色是指可以使用红色荧光、绿色荧光和蓝色荧光进行三重荧光染色。例如用免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠Cy3(P0193)进行红色荧光染色，随后可以用免疫荧光染色试剂盒-抗兔FITC(P0186)进行绿色荧光染色，在完成上述两种染色后可以使用Hoechst染色试剂盒(C0003)对细胞核进行染色，染色后为蓝色荧光。
提高检测灵敏度
为了提高检测灵敏度和特异性，实验时通常会采取一些信号级联放大系统，较为常用的有SABC（Streptavidin-Biotin Complex ）信号放大系统，检测时抗原首先与一抗结合，后者再与生物素标记的二抗结合；接着二抗上标记的生物素再与SABC-HRP/SABC-AP结合，加入HRP/AP底物进行显色即可检测到相应的信号。其中Streptavidin与Biotin-HRP/Biotin-AP形成的网络状复合物是信号放大的关键。
使用SABC系列试剂盒能够将检测灵敏度提高5-10倍，大大节省一抗用量。同时碧云天SABC系列试剂盒采用了比Avidin特异性更强、背景更低、灵敏度更高的Streptavidin，可以确保与生物素高度专一地结合。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P0603 | SABC-HRP Kit (IHC, ICC, Blotting & ELISA) | 1000次 | 357.00元 |
| P0606 | SABC-AP Kit (IHC, ICC, Blotting&ELISA) | 1000次 | 346.00元 |
| P0612 | SABC-HRP Kit with Anti-Mouse IgG (IHC&ICC) | 500次 | 480.00元 |
| P0615 | SABC-HRP Kit with Anti-Rabbit IgG (IHC&ICC) | 500次 | 485.00元 |
| P0625 | SABC-AP Kit with Anti-Mouse IgG (IHC&ICC) | 500次 | 423.00元 |
| P0628 | SABC-AP Kit with Anti-Rabbit IgG (IHC&ICC) | 500次 | 425.00元 |
如果您的待测蛋白丰度极低，推荐您使用P0276 SignalUp™免疫染色检测增敏剂，它可以直接用于一抗或二抗稀释配制，提高抗体特异性，从而增强免疫染色检测时抗原-抗体的特异性结合，将检测灵敏度提高数倍。并且可以有效降低背景，节省抗体用量。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P0276-100ml | SignalUp™免疫染色检测增敏剂 | 100ml | 292.00元 |
| P0276-500ml | SignalUp™免疫染色检测增敏剂 | 500ml | 998.00元 |
六. 封片
为了对染色后的切片进行长期保存，我们在染色完成后还会进行封片操作。非免疫荧光染色切片通常选用甘油明胶封片液；而免疫荧光染色切片则需要用抗荧光淬灭封片液进行封片。封片过程中需注意避免产生气泡，以免影响后续拍照。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P0126-5ml | 抗荧光淬灭封片液 | 5ml | 109.00元 |
| P0126-25ml | 抗荧光淬灭封片液 | 25ml | 289.00元 |
| P0128S | 抗荧光淬灭封片液(强) | 5ml | 102.00元 |
| P0128M | 抗荧光淬灭封片液(强) | 25ml | 272.00元 |
| P0131-5ml | 抗荧光淬灭封片液(含DAPI) | 5ml | 115.00元 |
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