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亚科因（武汉）生物技术有限公司
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因因
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湖北 武汉市 洪山区
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试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材
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ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）/ExKine™ Pro Total Protein Extraction Kit for Plant Tissues
品牌：Abbkine
￥198 - 498
咨询公司新闻/正文
科研达人手把手教你如何选择超优性价比的抗体 & 蛋白偶联试剂盒
人阅读 发布时间：2020-02-21 16:38
一：通俗定义偶联技术
将酶、生物素、荧光素、琼脂糖、磁珠等一些易于检测或易于分离的物质，用一定的技术共价标记或缀合到抗体、蛋白质或其它小分子物质上。
二：偶联技术产生背景
三：各品牌偶联试剂盒大揭秘（以 HRP 偶联试剂盒和绿色荧光偶联试剂盒为例）
1）HRP 偶联试剂盒
* Abbkine HRP 偶联试剂盒如何从结合抗体中去游离 HRP（分子量 40KD）？
Abbkine HRP 偶联试剂盒在设计时，已经考虑到这点。试剂盒可在反应结束时提供低水平的游离 HRP。因此，不需要过滤步骤，试剂盒中提供的终止液会封闭游离 HRP 的反应基团；
* ThermoFisher 品牌中 Protein A/G 柱子的作用是去除游离的 HRP。
2）绿色荧光偶联试剂盒
* 纯化柱的目的是要把未偶联的染料和偶联产物分开，因为染料都是小分子（分子量 1KD 左右），Abbkine 提供的纯化柱体积是 50KDa, 0.5 ml；ThermoFisher 提供的纯化柱也是针对抗体（抗体分子量 160KD 左右）的纯化。如果客户纯化的蛋白分子量小或者很大，需要自己配备合适的超滤管。
超滤管配备建议如下：
综上所述，你会选择哪个品牌的偶联试剂盒呢？作为 Abbkine 的铁粉，我再额外总结下 Abbkine LinKine 系列产品特点 & 优势:
将酶、生物素、荧光素、琼脂糖、磁珠等一些易于检测或易于分离的物质，用一定的技术共价标记或缀合到抗体、蛋白质或其它小分子物质上。
二：偶联技术产生背景
抗体、蛋白质或其它小分子的偶联是许多类型的生物学实验的必要步骤。
比如：为了在免疫测定（比如 WB/IHC/IF 等免疫学实验）中进行特异性蛋白的检测，我们将一抗或者二抗上偶联上酶、荧光素等；在细胞染色（生物成像）应用中，将活性染料（荧光素）直接与细胞外或细胞内的蛋白（多肽）结合，以产生可见且可测量的染色；将蛋白质或抗体上偶联琼脂糖或磁珠，提供了靶向纯化的方法。比如，Abbkine 用于 IP 实验的琼脂糖（磁珠）偶联的抗体，直接省去了 ProteinA/G 的使用。
三：各品牌偶联试剂盒大揭秘（以 HRP 偶联试剂盒和绿色荧光偶联试剂盒为例）
1）HRP 偶联试剂盒
| 品牌 | 可标记的样本类型 | 试剂盒组分 |
实验耗时 | 规格/价格 | 货期 |
| Abbkine | 样本含游离氨基即可 | 1. 预活化的 HRP 溶液 2. 偶联标记液 3. 反应终止液 |
3.5-4h |
3*20ug/￥1000 100ug/￥1200 3*100ug/￥1400 1mg/￥2200 |
现货 |
| Abcam | 30ug/￥2934 100ug/￥4089 300ug/￥4822 1mg/￥6152 5mg/￥20946 |
1-2 周 | |||
| Abnova | 3x40ug/￥3990 3x400ug/￥4410 | 1-2 周 | |||
| ThermoFisher | 1. 预活化的 HRP 溶液 2. 偶联标记液 3. 反应终止液 4. Protein A/G 柱子、结合液、洗脱液 |
过夜+＞2h | 300µg/￥10600 |
2-3 周 |
Abbkine HRP 偶联试剂盒在设计时，已经考虑到这点。试剂盒可在反应结束时提供低水平的游离 HRP。因此，不需要过滤步骤，试剂盒中提供的终止液会封闭游离 HRP 的反应基团；
* ThermoFisher 品牌中 Protein A/G 柱子的作用是去除游离的 HRP。
2）绿色荧光偶联试剂盒
| 品牌 | 可标记的样本类型 | 试剂盒组分 |
实验耗时 | 规格/价格 | 货期 |
| Abbkine | 样本含游离氨基即可 | 1. 预活化的荧光染料 2. 偶联标记液 3. 纯化柱 |
1.5h |
3*20ug/￥1200 100ug/￥1400 3*100ug/￥1600 1mg/￥2500 |
现货 |
| Abcam | 1. 预活化的荧光染料 2. 偶联标记液 3. 反应终止液 |
0.5-1h | 30ug/￥2593 100ug/￥4571 300ug/￥7106 1mg/￥10966 |
1-2 周 | |
| ThermoFisher | 1. 预活化的荧光染料 2. 偶联标记液 3. 纯化柱 |
1.5-2h | 100µg/￥8737 |
2-3 周 |
* 纯化柱的目的是要把未偶联的染料和偶联产物分开，因为染料都是小分子（分子量 1KD 左右），Abbkine 提供的纯化柱体积是 50KDa, 0.5 ml；ThermoFisher 提供的纯化柱也是针对抗体（抗体分子量 160KD 左右）的纯化。如果客户纯化的蛋白分子量小或者很大，需要自己配备合适的超滤管。
超滤管配备建议如下：
| 蛋白 | 超滤管 |
| 6<MW<20K | 3K |
| 20<MW<60K | 10K |
| 60<MW<100K | 30K |
| 100<MW<200K | 50K |
| 200K<MW | 100K |
综上所述，你会选择哪个品牌的偶联试剂盒呢？作为 Abbkine 的铁粉，我再额外总结下 Abbkine LinKine 系列产品特点 & 优势:
- 优化的方案 -遵循标准实验流程，凭借优异的预活化的染料，蛋白质比率和专利溶液配方，以获得最佳活性或者荧光。
- 操作简便- 三步操作即可实现，将偶联基团结合到抗体或者其它蛋白的伯胺位点上。
- 定制化 -改变摩尔比，反应缓冲液和pH值，以及其它参数，可实现不同水平的偶联和活性。
- 高效纯化 - 试剂盒包括纯化柱，确保快速有效地去除未反应的染料和优异的蛋白质/抗体回收。
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