Trizol试剂的基本特性

TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂，可直接从细胞或组织中提取总RNA，主要成分为苯/酚，含有异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等成分。其通过裂解细胞并抑制RNA酶活性保持RNA完整性，β-巯基乙醇可破坏RNase蛋白质中的二硫键 。试剂通过氯/仿分层后形成水相RNA、中层DNA及下层蛋白质，适用于人、动物、植物和细菌等样本，单次处理量为50mg至1g组织或5×10⁶至10⁷细胞。

TRIZOL操作流程包括匀浆裂解、氯/仿分层及异丙醇沉淀步骤，1小时内可完成批量样品处理。提取的RNA适用于印迹分析、分子克隆等实验，A260/A280比值≥1.8。试剂需4保存，含苯/酚等有毒成分，操作时应穿戴防护装备并使用化学通风橱，避免接触皮肤或吸入蒸气；若接触需立即用去垢剂和清水冲洗。

基本特点

Trizol试剂可以快速提取人、动物、植物、细菌不同组织的总RNA，该方法对少量的组织（50-100 mg）和细胞（5×106）以及大量的组织（≥1 g）和细胞（>107）均有较好的分离效果。TRIZOL试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRIZOL抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA 印迹分析、斑点杂交、poly(A)+ 选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。

并且利用DNA、RNA和蛋白质在不同溶液中的溶解性质，可以通过分层分别将不同层中的RNA（上层）、DNA（中层）、蛋白质（下层）分离纯化出来，效率极好。