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Gelred核酸凝胶染料的两种使用方法

20 人阅读发布时间:2026-01-16 10:19

GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。

 

预制凝胶法:

1. 将GelRed(10,000X)原液以1:10,000比例加入到熔化的凝胶中,混合均匀。(GelRed可在加热后的凝胶冷却至45℃左右时添加。)

2. 倒胶,室温放置等待凝固。

3. 按常规方法上样电泳。

4. 观察染色凝胶使用标准的透照仪(302或312 nm),成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR或GelStar滤光器凝胶成像也可以得到很好的结果。

5. 未使用的含有GelRed的预制凝胶可以重新熔化做胶,为保证最佳荧光信号,酌情添加适量染料。

*不建议长期储存含有GelRed熔化形式的琼脂糖。

*含有GelRed的预制胶可以保存在4℃供下次使用。

 

泡染法:

1. 按照常规方法进行凝胶电泳。

2. 稀释 GelRed :用水将10,000X储备液稀释3300倍制成3X染色液,通常情况下50mL染色液足够染一小块凝胶。(注:染色液中含有0.1 M NaCl能增强灵敏度,但可能会促使凝胶染色出现沉淀。)

3. 把凝胶放于合适的容器,如聚丙烯染色托盘中。添加足量的3X染色液至浸没凝胶。

4. 室温缓慢振荡染色30min。(注:最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同略有不同。对于含3.5-10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min至1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。)

5. 不必脱色,必要的话可以水洗以降低背景值。

6. 使用标准的透照仪(302或312 nm)观察染色凝胶,成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR 或 GelStar滤光器凝胶成像也可以得到很好的结果。

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