基质胶的使用方法

产品特性

Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色)，是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。

细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

注意:可将冻融后的Matrigel分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。

Matrigel在22-35温度环境下快速成胶，因此溶解时在4冰上过夜冻融(4度时会随着温度的上升部分成胶)。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。成胶后的Matrigel可以在424-48小时后重新呈液态。

推荐包被与成胶方法：

注意: 为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性，稀释浓度不应低于1:3，可用无血清培养基稀释，Matrigel成胶后立即使用。

 

薄胶成胶方法:

1.冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

2.将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。

3.在37放置30分钟，即可使用。

 

厚胶成胶方法:

1.冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

2.将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与Matrigel基质混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150-200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。

3.在37放置30分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。

 

薄层包被方法:

1.冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

2.根据使用需要，采用无血清培养基稀释Matrigel基质。根据实验需要确定最佳包被浓度。

3.将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。