ACK红细胞裂解液的原理及使用

原理：氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质，氨根离子不能通过细胞膜，而其他离子可以通过，造成细胞内外的离子浓度差异，形成了渗透压差，外部的水分会扩散至细胞内，使红细胞膨胀，达到裂解的效果。

使用说明：
组织细胞样品：
1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液；
2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入3-5ml裂解液），轻轻吹打混匀；
3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液；
4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次；
5.如裂解不完全可重复步骤2和3；
6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。

血细胞：
1.新鲜抗凝血，离心弃去上清液；
2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入6-10ml裂解液），轻轻吹打混匀；
3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液；
4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次；
5.如裂解不完全可重复步骤2和3；
6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。