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如何使用超滤管?

821 人阅读发布时间:2023-06-25 15:49

超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常> 90%) ,并达到30倍的浓缩。

根据标称分子量限值(NMWL)的不同,典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也降低了溶质极化造成的滤膜结垢;死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后,浓缩样本(截留部分)可通过一个简便的倒置(上下反转)离心步骤而实现高效回收。超滤管未经消毒,仅供一次使用。

 

应用方法:

1).浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(DNA/RNA样本,单链或双链)、噬菌体等微生物样本

2).纯化组织培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分,去除反应液中的引物、接头或分子标记,在HPLC前去除蛋白质。

3).除盐,缓冲液更换,或渗滤。

 

储存条件:

请在15-30℃的室温中存放。

 

预清洗:

超滤管的超滤膜含有微量甘油。如果担心干扰后续分析,可用缓冲液或Milli-Q水进行预清洗。如果干扰仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用缓冲液或Milli-Q8水清洗并甩干。

注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。

 

使用方法:

1).将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。

2).向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。

3).将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中央;用一个类似的超滤管平衡。

4).以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。

5).离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。

6).为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中央;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。

注意:要达到理想的回收效果,请尽早进行倒置离心。

 

脱盐或渗滤

脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成,具体过程是浓缩样本,弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行,直到杂质的浓度被充分降低。

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