TRIZOL的原理和作用

基本原理： TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂，采用变性剂即内含异硫氰酸胍、酚和β-疏基乙醇等变性物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。

各组分作用： 苯/酚： 主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白和核酸物质解聚得到释放。苯/酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性。
异硫氰酸胍： 属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质，并使蛋白质二级结构消失，细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离，保护RNA完整性。
β-疏基乙醇： β-疏基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。
8-羟基喹/啉： 0.1%的8-羟基喹/啉可以抑制RNase，与氯/仿联合使用可以增强抑制作用。
柠檬酸钠、EDTA： 可以络合金属离子，抑制金属离子对核酸酶的辅助作用，且具有良好的缓冲能力。
甘油： 促进苯/酚在溶液中的溶解，保证TRIZOL在4℃中保持单向存在。 PH： 低PH值的酚将使RNA进入水相，这样使其与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离。
氯/仿： 其主要用处是用来分相，实际上是加速有机相和水相的分层，也有变性蛋白质的作用。
异丙/醇： 沉淀核酸。增加RNA局部密度，使RNA从可溶状态变为固态不可溶状态。通过-OH的疏水作用使得RNA链中的亲水基团受到保护，等同于沉淀。
75%乙/醇： 无脱水作用，挥发性好从而减少水化层的形成，避免对下游实验造成影响。通过有机溶剂相似相溶的原理达到洗涤RNA的目的。
RNA酶抑制剂： 异硫氰酸胍和β-巯基乙醇，再加上冰水浴，可以显著降低RNA的降解速率。