(中)抑制剂使用技巧
187 人阅读发布时间:2021-09-13 11:18
抑制剂的使用技巧
实验中需要加多少抑制剂?
抑制剂的使用量受多种因素影响,包括抑制对象的可接触性,细胞通透性,孵育时间,细胞种类等等。我们建议通过检索文献确定使用抑制剂的起始浓度。如果有报道的Ki值或IC50值,可以采用其5-10 倍的量开始尝试以达到抑制酶活性的最佳效果。如果抑制剂的Ki值或IC50值未知,则需要在更广泛的范围尝试抑制剂的使用浓度,并采用Michaelis-Menten动力学计算Ki值。采用高浓度抑制剂而没有抑制效果,甚至得到相反的结果等情况并不罕见。最好设立溶解抑制剂所采用的溶剂作为对照,以 排除溶剂的非特异性影响。