胎球蛋白A(Fetuin A)增强CAR-T的渗透能力的应用

采用胎球蛋白A(Fetuin A)增强CAR-T细胞在实体瘤中的渗透能力,可以从以下几个方面实现:

 

1. 将Fetuin A基因转染至CAR-T细胞,使其在体内持续分泌Fetuin A蛋白。Fetuin A具有促进血管生成和增强血管通透性的作用,可以通过改善肿瘤血管的形成和通透性来增强CAR-T在肿瘤中的渗透。
2. 也可以在CAR-T细胞表面过表达Fetuin A受体,如CSF-1受体等。在CAR-T细胞输注入体后,体内的Fetuin A蛋白可以作用于CAR-T表面的受体,激活下游信号如PI3K/Akt和MAPK通路,进而促进CAR-T细胞的运动与侵袭,增强其在肿瘤组织中的渗透。
3. 将编码趋化受体CXCR4的基因也转染到CAR-T细胞,使其同时表达CAR、Fetuin A和CXCR4。在此情况下,Fetuin A可通过促进CXCL12的分泌来吸引CXCR4阳性的CAR-T细胞向肿瘤部位迁移和渗透。CXCR4作为一种肿瘤相关的趋化受体,这种策略可以进一步提高CAR-T在肿瘤中的选择性渗透。
4. 也可以采用Fetuin A修饰的病毒载体来转导CAR-T细胞,如Fetuin A修饰的慢病毒或腺病毒载体。这些载体可以利用Fetuin A与肿瘤血管内皮细胞或肿瘤细胞的高亲和力与选择性相互作用,带领CAR-T细胞首先靶向肿瘤血管或肿瘤细胞,然后释放CAR-T细胞于肿瘤部位,实现高效而选择性的渗透。
验证：
1. 在体外实验中检测转染Fetuin A基因或过表达Fetuin A受体的CAR-T细胞,其迁移和侵袭能力是否显著增强。这可以通过细胞划痕实验和Transwell小室实验来测定。如果其运动与侵袭能力显著提高,则证实Fetuin A可以促进CAR-T细胞的渗透。
2. 在肿瘤动物模型中比较普通CAR-T细胞与Fetuin A修饰的CAR-T细胞在肿瘤中的定植与渗透。这可以通过活体成像和免疫组织化学染色来观察CAR-T细胞在肿瘤中的聚集与渗透程度。如果Fetuin A修饰的CAR-T细胞可以更加高效而专一地渗透至肿瘤部位,则证实这种策略的有效性。
3. 检测不同策略下CAR-T细胞对正常组织的影响程度。理想情况下,Fetuin A修饰的CAR-T细胞应主要作用于肿瘤组织,对正常组织的渗透和损伤最小。这也是评估其安全性和有效性的重要指标。
4. 观察CAR-T细胞指向性转移至肿瘤部位的速度与效率。如果采用Fetuin A修饰可以加速CAR-T细胞向肿瘤的转移和聚集,这也部分证实其可以增强CAR-T的渗透能力。
5. 监测实体瘤的消退速度与程度。如果采用Fetuin A修饰的CAR-T细胞可以更快速更加彻底地清除实体瘤,这也间接提示其渗透能力得到了增强。
产品：Y07501 重组人胎球蛋白A Recombinant human Fetuin A
内毒素：小于5EU/mg.
纯度：SDS-PAGE检测，纯度大于95.0%。

规格：50ug/1g（工业客户 100g和kg包装）