产品介绍

博迈德公司生产的Turbo感受态细胞是采用大肠杆菌Turbo菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。Turbo菌株是生长最快的大肠杆菌菌株，菌株平板上6.5小时可见克隆，摇菌4-6小时可提取质粒。

核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量。菌株的LacIq基因的表达受到严格控制，可克隆毒性基因。

ΔlacZM15基因的存在可用于蓝白斑筛选。菌株还具有抗T1噬菌体感染的特点。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>×10⁹cfu/μg DNA。

基因型

F'proA+B+lacIqΔlacZM15/fhuA2Δ(lac-proAB)glnVgalK16galE15R(zgb-210::Tn10)TetSendA1thi-1Δ(hsdS-mcrB)5

菌株抗性

对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素敏感

质粒转化步骤

2. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入1-5μl含有1-100ng的质粒DNA或5-10μl连接产物到细胞中，用手指拨打管底，轻轻混匀。

4. 冰水浴中放置30分钟，不要晃动。

6. 42℃热击60秒钟，不要晃动。

8. 冰水浴中放置2分钟，不要晃动。

10. 加入500μl的室温的SOC或LB培养基。

12. 置于37℃摇床中，150-200rpm震荡复苏培养60分钟。

14. 取50-100μl菌液涂布在含有抗性的LB平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃过夜培养。

平板划线分离法

复苏培养结束后，4000rpm离心30秒钟，弃掉上清，留100μl左右的液体，用200μl吸头轻轻吹打散菌块，取10μl重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。此方法主要适用于质粒转化，连接产物转化最好用涂布法。

质粒快速转化步骤

对于氨苄青霉素抗性的质粒，将步骤2的时间缩短到5分钟，完成步骤4后，可直接涂布或划线于含氨苄青霉素抗性的LB平板上。其它抗性的质粒仍需60分钟的复苏培养。