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技术资料/正文
45 人阅读发布时间:2025-07-23 09:16
在生命科学研究和生物医药开发领域,获取稳定、可靠且能持续传代的特定类型细胞模型至关重要。对于研究肌肉生理、病理机制、药物筛选及毒性测试而言,人骨骼肌细胞扮演着无可替代的角色。然而,原代分离的人骨骼肌细胞在体外培养中存在一个显著的瓶颈——有限的增殖能力和不可避免的衰老(Hayflick极限)。这极大地限制了其在大规模实验、长期研究和标准化应用中的潜力。
永生化技术:突破细胞衰老的“枷锁”
为了解决这一难题,细胞永生化技术应运而生。永生化是指通过特定的技术手段,赋予原本具有复制衰老特性的细胞以无限增殖的能力,使其能够在体外长期、稳定地培养和传代,同时(理想情况下)保留其主要的分化功能和表型特征。
人骨骼肌细胞永生化的核心技术路径
目前,实现人骨骼肌细胞永生化的主流策略通常涉及引入特定的外源基因,以调控细胞周期和端粒维持:
SV40 大 T 抗原 (SV40 Large T Antigen): 这是应用最广泛的永生化工具之一。SV40大T抗原能通过结合并失活关键的抑癌蛋白(如p53和pRb),解除细胞周期的正常刹车,驱动细胞持续分裂。利用病毒载体(如慢病毒、逆转录病毒)将编码SV40大T抗原的基因稳定整合到原代人骨骼肌细胞的基因组中,是常见的操作。
人端粒酶逆转录酶 (hTERT): 细胞衰老的一个重要机制是端粒(染色体末端的保护性结构)随着每次细胞分裂而缩短。hTERT是端粒酶的核心催化亚基,其表达可以重建端粒酶活性,不断延长端粒,从而绕过因端粒缩短触发的复制性衰老。单独使用hTERT或与SV40大T抗原联用,能更有效地实现稳定永生化。
其他策略: 还包括利用癌基因(如c-Myc)、特定microRNA或条件性永生化系统(如温度敏感型SV40大T抗原)等,以追求在获得无限增殖能力的同时,更好地保留细胞的分化潜能或实现增殖与分化的可控切换。
永生化人骨骼肌细胞的巨大价值与应用
成功构建的永生化人骨骼肌细胞系,为科学研究和产业应用带来了革命性的便利:
稳定的细胞来源: 提供近乎无限量的、遗传背景相对一致的骨骼肌细胞,解决了原代细胞来源稀缺、批次间差异大的问题。
高通量药物筛选与毒性测试: 为开发治疗肌肉萎缩症(如杜氏肌营养不良)、肌炎、代谢性肌病以及衰老相关肌少症等疾病的药物,提供了强大的体外筛选平台。可大规模测试化合物对细胞活力、增殖、分化和特定信号通路的影响,评估药物疗效和潜在的肌肉毒性。
疾病机制研究: 可构建携带特定致病基因突变的永生化细胞系(或通过基因编辑技术在永生化的野生型细胞系中引入突变),用于深入研究肌肉疾病的分子病理机制。
肌肉生物学基础研究: 为研究骨骼肌细胞的发育、分化、代谢、收缩机制以及应对刺激(如运动模拟、营养、应激)的反应提供了长期、可重复的实验模型。
组织工程与再生医学: 作为种子细胞的潜在来源(尤其是在条件性永生化系统下),用于构建体外肌肉组织模型或探索肌肉再生的策略。
标准化与可重复性: 同一永生化细胞系可在不同实验室间共享和使用,极大提高了实验数据的可比性和可重复性。
北京百欧博伟生物技术有限公司:您可靠的细胞技术伙伴
北京百欧博伟生物技术有限公司,作为专注于生命科学前沿技术和产品服务的领先供应商,深刻理解高质量细胞模型对科研和产业转化的重要性。我们致力于:
提供先进的永生化技术服务: 依托成熟的病毒载体构建、细胞转导/转染和细胞培养平台,为客户提供专业、高效的人骨骼肌细胞(以及其他多种细胞类型)永生化定制服务。
开发高品质的永生化细胞产品: 严格筛选和鉴定,推出经过充分验证、性能稳定的永生化人骨骼肌细胞系,确保其具有良好的增殖能力、可诱导的分化潜能以及相关的生物学特征。
提供全面的技术支持: 从细胞选择、永生化策略设计到建系后的培养、冻存、复苏和质量控制,提供全方位的技术咨询和支持。
结语
人骨骼肌细胞的永生化技术,成功打破了体外研究的细胞衰老壁垒,为深入探索肌肉的奥秘、加速肌肉相关疾病的药物研发以及推动肌肉再生医学的发展,提供了强大而持久的工具。北京百欧博伟生物技术有限公司,将持续聚焦于细胞技术创新,以高品质的永生化细胞产品和服务,助力全球科研人员和医药企业,共同推动肌肉健康领域的进步,解锁无限可能。