LD-1小鼠胆管癌细胞系：全面解析与应用指南

　　 北京百欧博伟生物技术有限公司为您提供高质量的肿瘤研究工具，助力科研探索。在肝胆肿瘤研究领域，LD-1小鼠胆管癌细胞系凭借其独特来源与稳定特性，成为深入探究胆管癌发病机制、药物筛选与治疗策略的宝贵模型。

LD-1小鼠胆管癌细胞系：全面解析与应用指南

1. 来源与背景

• 起源： LD-1细胞系是从携带特定致癌基因突变（如Kras突变）的小鼠模型肝脏肿瘤中分离、培养并鉴定而来。其原始肿瘤具有明确的胆管细胞癌特征。

• 物种： 小鼠 (Mus musculus)

• 组织类型： 胆管癌 (Cholangiocarcinoma, CCA)

• 建立时间： 该细胞系通常在相关研究文献中描述其建立过程（具体建立年份需参考原始文献，通常在近十年内建立并应用）。

2. 细胞特性

• 形态学： LD-1细胞在体外培养中通常呈现典型的上皮样细胞形态。细胞呈多边形或不规则形，具有清晰的细胞边界，以贴壁方式生长，可形成紧密连接的单层。

• 生长特性：

  • 贴壁生长： 严格依赖培养皿/瓶表面生长。

  • 倍增时间： 通常在体外培养条件下，其群体倍增时间约为20-30小时（具体需依据培养条件优化），具有稳定的增殖能力。

  • 培养基： 推荐使用高糖DMEM培养基，添加10%胎牛血清 (FBS) 和1%青霉素-链霉素双抗溶液。需在37°C、5% CO2的饱和湿度培养箱中培养。

  • 传代： 细胞生长至约80-90%融合度时需进行传代。常用胰蛋白酶（如0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液）消化，消化时间通常为1-3分钟（需显微镜下观察）。传代比例通常在1:3至1:6之间，依据细胞状态和实验需求调整。定期冻存保种至关重要。

• 分子标志物 (需实验验证，常见阳性表达)：

  • 细胞角蛋白19 (CK19)： 胆管上皮细胞的经典标志物，阳性表达强烈支持其胆管上皮来源。

  • 细胞角蛋白7 (CK7)： 另一种胆管上皮常见标志物。

  • SOX9： 胆管细胞发育和维持的关键转录因子，常在胆管癌中表达。

  • EpCAM (CD326)： 上皮细胞粘附分子，在多种上皮性肿瘤中表达。

  • 特定癌基因/突变： 可能保留其来源小鼠模型的特征性基因突变（如Kras突变），是其研究价值的重要基础。

• 致瘤性：

  • 体内成瘤： LD-1细胞在免疫缺陷小鼠（如NOD/SCID或裸鼠）体内具有明确的致瘤能力。

  • 成瘤部位： 可通过原位（如肝内胆管注射）或异位（如皮下注射）接种形成肿瘤。

  • 肿瘤特征： 形成的肿瘤在组织病理学上能再现小鼠或人胆管癌的关键特征，如腺管样结构、细胞异型性、间质反应等，是研究胆管癌体内生长、侵袭和转移的可靠模型。

3. 核心科研价值与应用领域

• 胆管癌发病机制研究： 探究驱动胆管癌发生发展的关键信号通路（如KRAS通路、EGFR通路、Notch通路、Hedgehog通路、炎症相关通路等）、肿瘤微环境相互作用、上皮-间质转化(EMT)过程。

• 新型治疗策略开发：

  • 药物筛选： 高通量或低通量筛选针对胆管癌的潜在化疗药物、靶向药物（如针对KRAS下游效应分子、IDH1突变、FGFR融合等的药物）、免疫治疗药物（需结合免疫重建模型）及天然产物。

  • 药效学评价： 在体外评估候选药物的细胞毒性、增殖抑制、凋亡诱导、周期阻滞等效应；在体内评估药物的抗肿瘤活性、药代动力学和潜在毒性。

  • 耐药机制研究： 建立获得性耐药细胞株模型，研究胆管癌细胞对化疗或靶向治疗产生耐药的分子机制。

• 转移机制研究： 利用其体内转移潜能（尤其在原位模型中），研究胆管癌细胞侵袭、迁移、定植的分子基础和调控网络。

• 肿瘤微环境研究： 研究癌细胞与成纤维细胞、免疫细胞、血管内皮细胞等肿瘤微环境组分的相互作用及其对肿瘤进展和治疗反应的影响。

• 生物标志物发现与验证： 筛选和验证与胆管癌诊断、预后预测或治疗反应相关的潜在生物标志物。

4. 使用注意事项

• 细胞认证： 强烈建议在使用前或定期进行细胞鉴定，包括STR分型（小鼠细胞有其特定panel）、形态学观察、关键标志物（如CK19）表达的检测，以确保细胞身份无误，排除交叉污染或误认。

• 支原体检测： 定期进行支原体污染检测，避免污染对实验结果造成干扰。支原体污染会严重影响细胞生长、基因表达和实验结果的可重复性。

• 培养条件优化： 虽然推荐使用DMEM+10% FBS，但不同实验室环境或特定实验需求（如无血清培养、药物处理）可能需要对培养基成分（如血清浓度、添加生长因子）或传代方法进行微调优化。

• 冻存与复苏： 使用合适的冻存液（通常含90% FBS + 10% DMSO），采用程序性降温冻存于液氮中。复苏时动作要迅速，采用合适的方法（如水浴）快速融化并立即转移至含预温培养基的离心管中稀释DMSO，离心去除冻存液后重悬接种。

• 生物安全： 严格遵守实验室生物安全规范进行操作，特别是在处理可能携带病毒（如果来源小鼠模型有）或进行动物实验时。废弃物需按规定处理。

5. 为何选择LD-1细胞系？

• 特异性： 明确的小鼠胆管癌来源，病理特征清晰。

• 实用性： 体外增殖稳定，易于培养和操作；体内成瘤性强，是连接体外研究与体内验证的桥梁。

• 机制相关性： 通常携带与人类胆管癌相关的特定基因突变（如Kras），为研究特定分子机制提供了直接模型。

• 应用广泛： 覆盖基础机制探索、药物发现、疗效评价等多个关键研究环节。

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