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技术资料/正文
175 人阅读发布时间:2025-04-01 14:37
细胞培养是生物医学研究、药物开发及生物制品生产的核心技术环节。污染不仅会导致实验失败、数据偏差,还可能造成珍贵细胞系的损失。为帮助科研人员有效防控污染,北京百欧博伟生物技术有限公司结合多年技术经验,整理以下防控指南。
生物污染
细菌/真菌:操作环境不洁、耗材灭菌不彻底、人员操作失误。
支原体:血清或试剂污染、气溶胶传播。
病毒/交叉污染:不同细胞系共用设备或试剂。
化学污染
培养基成分降解、水质不纯、残留消毒剂。
物理污染
温度、CO₂浓度波动,或培养箱内异物进入。
空气净化:使用层流超净工作台(定期检测风速及滤网更换),实验室配备HEPA空气过滤系统。
温湿度控制:维持实验室温度22–25°C、湿度50–70%,减少微生物滋生。
定期消毒:每日用75%乙醇擦拭台面,每周使用紫外灯照射30分钟以上。
个人防护:穿戴无菌实验服、手套及口罩,操作前用75%乙醇消毒双手。
无菌操作:
试剂瓶开启前酒精灯灼烧瓶口。
移液枪避免接触培养瓶内壁。
禁止在开放环境中暴露培养皿。
分区操作:细胞操作区与物品准备区严格分离,避免交叉污染。
使用经γ射线灭菌的耗材(如本公司提供的细胞培养瓶、离心管)。
每批次血清、培养基需进行无菌试验及支原体检测(推荐本公司支原体检测试剂盒)。
CO₂培养箱:每月清洁内腔并更换灭菌水盘,定期校准温湿度传感器。
生物安全柜:每年进行第三方检测认证。
定期检测细胞状态(推荐本公司MycoAlert®支原体检测试剂)。
新引进细胞系需隔离培养2周,确认无污染后再使用。
细菌污染:培养液浑浊,显微镜下可见快速移动颗粒。
真菌污染:培养液中出现絮状或丝状漂浮物。
支原体污染:细胞生长缓慢、形态改变,需通过PCR或荧光染色确认。
立即隔离:污染样本移至独立区域,避免扩散。
高压灭菌:污染细胞及培养基121°C高压处理30分钟。
彻底消毒:超净台、培养箱及相关仪器用0.5%过氧乙酸擦拭。
记录分析:填写污染事件报告,追溯污染来源。
定期培训:每季度开展无菌操作及污染应急演练。
环境监测:使用空气沉降菌检测平板评估实验室洁净度。
试剂备份:重要细胞系冻存于液氮(推荐本公司程序降温盒)。
细胞培养污染防控需贯穿于实验室管理的每个细节。北京百欧博伟生物技术有限公司始终致力于为科研工作者提供高品质细胞培养耗材、检测试剂及技术支持。
另外,公司还新增了专注于科研细胞,及其周边产品研发及提供的高端品牌,“易欧赛生物(EOUCELL)”,主要业务涵盖原代细胞、细胞系,细胞培养基及细胞周边耗材等!从2024年6月30日起,北京百欧博伟生物技术有限公司,与武汉易欧赛生物技术有限公司,签订战略合作协议,由武汉易欧赛生物技术有限公司,进行北京百欧博伟生物技术有限公司,品牌易欧赛生物的全方位生物技术支持!