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163 人阅读发布时间:2025-02-20 09:21
普通脱硫弧菌(Desulfovibrio vulgaris)是一种厌氧硫酸盐还原菌,培养时需满足以下条件:
温度:30-37°C
pH值:6.5-7.5
厌氧环境:需在无氧条件下培养,可通过厌氧罐或厌氧工作站实现。
培养基:常用Postgate's C培养基,成分包括:
乳酸钠(碳源)
硫酸钠(电子受体)
酵母提取物(氮源和维生素)
磷酸盐缓冲液(维持pH)
还原剂(如半胱氨酸或硫化钠,维持低氧化还原电位)
若菌株为冻存或长期保存,需进行活化,步骤如下:
准备培养基:
配制Postgate's C培养基,分装至厌氧瓶中。
通入氮气或混合气体(如N₂:CO ₂=80:20)以去除氧气。
高压灭菌后冷却至室温。
接种:
在厌氧条件下,将冻存菌液接种至培养基中。
使用无菌注射器或厌氧操作技术避免氧气进入。
培养:
将接种后的培养基置于30-37°C厌氧环境中培养。
培养时间通常为24-48小时,具体视菌株生长情况而定。
观察生长:
通过显微镜观察菌体形态和数量,或通过培养基变黑(硫化铁生成)判断生长情况。
传代培养:
若菌株生长良好,可进行传代培养,进一步扩大培养量。
严格厌氧:操作时避免氧气进入。
无菌操作:防止污染。
定期传代:长期保存的菌株需定期活化以维持活性。
通过以上步骤,可成功培养和活化普通脱硫弧菌。
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