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技术资料/正文

bio-092027普通脱硫弧菌培养条件及活化步骤

163 人阅读发布时间:2025-02-20 09:21

1. 培养条件

普通脱硫弧菌(Desulfovibrio vulgaris)是一种厌氧硫酸盐还原菌,培养时需满足以下条件:

  • 温度:30-37°C

  • pH值:6.5-7.5

  • 厌氧环境:需在无氧条件下培养,可通过厌氧罐或厌氧工作站实现。

  • 培养基:常用Postgate's C培养基,成分包括:

    • 乳酸钠(碳源)

    • 硫酸钠(电子受体)

    • 酵母提取物(氮源和维生素)

    • 磷酸盐缓冲液(维持pH)

    • 还原剂(如半胱氨酸或硫化钠,维持低氧化还原电位)

2. 活化步骤

若菌株为冻存或长期保存,需进行活化,步骤如下:

  1. 准备培养基

    • 配制Postgate's C培养基,分装至厌氧瓶中。

    • 通入氮气或混合气体(如N₂:CO ₂=80:20)以去除氧气。

    • 高压灭菌后冷却至室温。

  2. 接种

    • 在厌氧条件下,将冻存菌液接种至培养基中。

    • 使用无菌注射器或厌氧操作技术避免氧气进入。

  3. 培养

    • 将接种后的培养基置于30-37°C厌氧环境中培养。

    • 培养时间通常为24-48小时,具体视菌株生长情况而定。

  4. 观察生长

    • 通过显微镜观察菌体形态和数量,或通过培养基变黑(硫化铁生成)判断生长情况。

  5. 传代培养

    • 若菌株生长良好,可进行传代培养,进一步扩大培养量。

3. 注意事项

  • 严格厌氧:操作时避免氧气进入。

  • 无菌操作:防止污染。

  • 定期传代:长期保存的菌株需定期活化以维持活性。

通过以上步骤,可成功培养和活化普通脱硫弧菌。

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