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102 人阅读发布时间:2025-02-17 16:53
细胞培养基,作为细胞生长与繁殖的关键环境,不仅为细胞注入必需的营养成分,还精心营造了一个适宜的成长环境。在细胞培养的起点,挑选出最适合的培养基,无疑是养好细胞的重中之重。本期细胞学堂将带您深入探索各类特色培养基,并指导您如何依据关键指标进行选择,让您轻松应对不同实验挑战,迅速锁定理想的培养基。
常见细胞培养基
细胞培养基是一个复杂而多样的领域,其中常见的类型包括基础培养基、完全培养基和无血清细胞培养基。基础培养基,主要是指那些未添加血清的合成培养基,以及专为特定原代细胞设计的专用基础培养基。无血清培养基则是一种通过添加已知成分,如转铁蛋白、白蛋白、胰岛素等,来替代血清的培养基,适用于特定细胞的培育。而完全培养基,是在基础培养基的基础上加入血清,并可能包含一些特殊的细胞生长因子和抗生素的培养基。
此外,还有一类特殊的细胞培养基,它们属于合成培养基的范畴,通常需要与血清或血清替代物结合,以配制成适合特定细胞生长的完全培养基。这类特殊培养基的使用,需要根据实验需求和细胞特性进行精心选择和搭配。
Fischer's培养基
由Glen Fischer在美国国家癌症研究所精心设计并研制,最初专为小鼠白血病细胞的培养而开发,如今已广泛应用于造血细胞的培养,如淋巴母细胞和淋巴细胞。这种培养基精心配制,包含多种细胞生长所必需的氨基酸、维生素及无机盐,且不添加蛋白质、脂类或任何外源性生长因子,为细胞提供纯净且必要的生长环境。
William's E培养基
由William与Gunn携手研制,最初专为培养大鼠肝上皮细胞而设计,但同样适用于其他哺乳动物的肝细胞培养。此培养基精心配制,包含众多细胞生长所必需的氨基酸、维生素及无机盐,且不含蛋白质、脂类或外源性生长因子。通过灵活调整L-谷氨酰胺的用量,并辅以新鲜添加的L-谷氨酰胺或其替代物,可进一步优化细胞的生长与增殖环境。
MCDB 131培养基
专为特定细胞设计的低蛋白、无血清培养基,由Knedler和Ham精心研制,最初旨在培养人微血管内皮细胞(HMVEC)。随着研究的深入,其应用已扩展至多种细胞类型,包括肝细胞、平滑肌细胞和心肌细胞等。MCDB 131培养基的独特之处在于其包含的微量元素、腐胺、腺嘌呤、胸腺嘧啶,以及高浓度的氨基酸和维生素。使用时,常与表皮生长因子(EGF)、氢化可的松、谷氨酰胺以及适量血清搭配,血清浓度需依据细胞类型进行调整。
Opti-MEM I减血清培养基
经过精心改良,成为一种高效的最低必需培养基。它能够在降低50%常规血清使用量的条件下,依旧能够支持细胞的正常生长与增殖。这一独特的性质,使得Opti-MEM I减血清培养基在细胞转染及其他关键实验操作中展现出显著的优势。
培养基的选用指标
01糖的浓度
高糖培养基更适宜高代谢率及高密度细胞的培养需求。
02酚红
酚红作为一种酸碱指示剂,能辅助判断试剂的pH值变化,其颜色在酸性环境下偏黄,而在碱性环境下则偏紫。
03 GlutaMAX
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,作为L-谷氨酰胺的改进版本,具有出色的稳定性,可替代易降解的L-谷氨酰胺。
04钙、镁离子
在细胞培养中,钙、镁离子能促进细胞间的连接,增强细胞的黏附性。若需培养悬浮细胞,则应选择无钙镁离子的培养基。