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技术资料/正文
129 人阅读发布时间:2025-02-06 15:54
细胞在体外能够成功生长,培养基的选择及培养方法的优化十分关键。
细胞在单纯的培养基中不能存活,各种类型的细胞培养中必须提供某些生长因子、黏附和伸展因子、微量元素等营养物质。
传统培养基中一般会添加动物血清如牛血清等。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。其中胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
血清培养的优势与局限
采用天然来源的血清作为细胞培养添加物,优势在于提供丰富全面的细胞生长必需的营养,并且提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,调节其活性。结合蛋白还能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。血清还是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
但血清的使用也存在一定局限性。
(1)血清可能含有细胞生长抑制因子和毒性因子,存在潜在毒性;
(2)血清的获取成本高,价格较为昂贵;
(3)血清由于成分不完全明确,给细胞培养的标准化带来困难,同时也给细胞表达目的产物纯化等下游操作带来困难。
无血清培养优势
由于常规血清培养基存在上述问题,近年来无血清培养基越来越受到重视,其开发和应用渐成趋势。无血清培养基不含动物血清或其他生物提取液,仍可使细胞在体外较长时间生长、增殖或维持。
无血清培养基可以针对特定的细胞类型配制专用的培养基,如人间充质干细胞培养基,可以帮助精确地控制细胞的增殖和分化过程等。
无血清培养基尤其应用于哺乳动物细胞的大规模工业培养。同时,它也是研究细胞生长、增殖、分化及基因表达调控的有力工具。
无血清培养基具有以下优点:
(1)其组成明确,可避免血清不同批次带来的质量变动,提高可重复性。
(2)避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染风险。
(3)避免血清不明组分对实验研究的影响。
(4)有利于体外培养细胞的分化。
(5)可提高细胞产物的表达水平并易于纯化。
所以,说了这么多,您是在进行细胞的常规有血清培养还是无血清培养呢?您更看好哪一方呢?