绿针假单胞菌橙色亚种培养说明-百欧博伟生物

　　一、菌种简介

　　中文名称：绿针假单胞菌橙色亚种

　　拉丁名称：Pseudomonas chlororaphis subsp.aurantiaca

　　其它保藏中心编号：CGMCC No.7099

　　来源历史：←上海师范大学生命与环境科学学院

　　收藏时间：2015-06-02

　　原始编号：JD37

　　原产国：中国

　　资源归类编码：15131134101

　　模式菌株：非模式菌株

　　主要用途：研究；生产

　　特征特性：将JD37菌株在KB培养基上划线接种，非厌氧环境下，28℃下培养24 h后菌落直径达2 mm，菌落圆形微隆起，微黄色，边缘光滑，表面较湿润，易挑起。培养48 h后菌体产生橘红色色素，覆盖在菌落表面，同时菌落周围产生橘黄色色素。Genebank注册号：GQ358919。

　　具体用途：具促生作用，对真菌病害有拮抗作用。可产生抗生素吩嗪-1-羧酸（PCA）和植物生长素吲哚-3-乙酸（IAA）。可用于微生物教学研究，也可用于微生物肥料的制备。

　　生物危害程度：四类

　　培养基编号：CM0002

　　培养基名称：营养肉汁琼脂

　　培养基成分：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl 5.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1.0L，pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。

　　培养温度：28℃

　　需氧类型：好氧

　　分离基物：植物根际土壤

　　采集地：上海市嘉定区

　　保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

　　共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

　　二、储存条件

　　斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在2～8°C保存。西林瓶请置于-20°C保存。甘油管请置于-80°C保存;请勿长期置于室温。三、培养条件

　　1、培养基编号：营养肉汤琼脂（Nutrient Agar）

　　2、培养基成分：蛋白胨5.0 g；牛肉浸粉3.0 g；NaCl 5.0 g；琼脂15.0 g；蒸馏水1000.0mL；pH 7.0；培养芽胞杆菌时加入5 mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽胞。以上成分121℃，灭菌15 min。液体培养基不添加琼脂。推荐使用成品培养基。

　　3、需氧类型：好氧

　　4、培养温度：28℃

　　四、注意事项

　　1、菌种常规培养时间：细菌1-2天，酵母3天，霉菌5-7天，大型真菌7-10天。2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。

　　3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

　　4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org）。冻干管打管说明书

　　1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒，将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热；立即滴2-3滴无菌水于加热部位，使管壁破裂；再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。

　　2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.5ml左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有4~5mL液体培养基的试管中混匀，并取100μL转接到固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。

　　3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在2-8℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，延迟期较长，需要转接至2-3代恢复活力。

　　4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

　　5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

　　6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

　　7、打管操作应在烧杯或托盘上方进行，用完冻干管应灭菌处理后丢弃。8、如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到菌种后2个月内联系，逾期不予受理。9、甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。