MRC-5（人胚肺细胞）有限细胞系培养攻略及售后

细胞名称 ：MRC-5（人胚肺细胞） 

种属 人 

年龄（性别） 男；14周龄 

组织来源 肺 

生长特性 贴壁 

细胞形态 成纤维细胞样 

背景描述 MRC-5细胞来自14周龄男性胎儿的正常肺组织；MRC-5细胞老化前能传代42-46次群体倍增。MRC-5细胞是正常二倍体细胞系，46条染色体、XY核型。模式染色体数为46，概率为70%。 

生长培养基 MEM＋10% FBS＋1% P/S

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
一、产品信息：
1. 平台编号：bio-73102
2. 细胞名称：MRC-5 人胚肺细胞
3. 物种：男；14 周龄
4. 组织：胚肺
5. 细胞形态：成纤维细胞样，贴壁生长
6. 细胞描述:MRC-5 细胞来自 14 周龄男性胎儿的正常肺组织；MRC-5 细胞老化前能传代42-46 次群体倍增。MRC-5 细胞是正常二倍体细胞系，46 条染色体、XY 核型。模式染色体数为 46，概率为 70%。 二、培养方式：
1. 培养基：MRC-5 专用培养基【 MEM 培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%】2. 培养环境：37℃、5%CO2
3. 传代培养：当细胞密度达到 80%以上时，可以进行传代，传代比例1:2~1:4，1~2 天传代一次。
（1）用巴氏滴管吸出细胞培养瓶内的培养基；
（2）加入 1ml 的 PBS，轻轻晃动润洗细胞，然后将 PBS 吸出；
（3）加入 1ml 的胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化1~3 分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间）；
（4）在显微镜下观察，发现细胞变圆，轻轻晃动细胞便开始脱落，这时可以终止消化；（5）加入 4ml 含血清的完全培养基，用移液器吹打细胞，使细胞脱落并形成单细胞悬液；（6）将细胞悬液转移到 15ml 的离心管，1000rpm 离心 5min；
（7）离心完成后吸出上清丢弃，再用移液管取 10ml 完全培养基将细胞重悬，轻轻吹打混匀；（8）将细胞悬液分装到两个新的 T25 细胞培养瓶中，放在 37℃的 CO2培养箱中进行培养。4. 细胞冻存：使用本公司无血清冻存液可直接将细胞冻存在-80℃（无需使用程序降温盒），细胞在-80℃可保存 3 年，长期保存建议使用液氮罐。
5.冷冻复苏细胞：将含有 1mL 细胞冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，补加 4-6mL 完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 6cm 皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
三、质量检测：
1. STR 鉴定：正确
2. 细菌检测：阴性
3. 支原体检测：阴性
四、售后服务：
1. 收到细胞后请及时查看瓶身有无破损，是否漏液等现象；
2. 用 75%的酒精喷洒培养瓶之后，放在培养箱中静置 2-4 小时以稳定细胞状态，然后用显微镜观察细胞状态并拍照记录，40 倍和 100 倍照片各一张（细胞在运输过程中存在少量的漂浮或者死亡属于正常现象）；
3. 原瓶中的培养基不建议继续使用，请配制新的完全培养基或者购买本公司的专用培养基；4. 建议定期对细胞进行拍照记录；收到细胞后 7 天内，对细胞生长状态有任何问题，可申请售后。
5. 强烈建议：在第一次细胞传代时，使用者购买本公司配置的细胞培养基将细胞按照1:2进行传代，可以对比测试自配的培养基是否可以养好细胞。
如果有以上任何问题，请及时联系本公司。
五、注意事项：
1. 本产品仅限于科研用途，若用于临床诊断、治疗等其它用途，本公司概不负责！2. 若使用本产品发表科学论文，请标注：MRC-5 由北京百欧博伟生物技术有限公司（biobw）提供。