罗伦隐球酵母形态特征、保藏条件及打管说明

　　一、罗伦隐球酵母简介

　　罗轮隐球酵母是Cryptococcus属的微生物，原产地为中国。

　　形态特征

　　细胞卵形,单个或成双，菌落奶油色至浅黄,表面平滑有光泽；利用葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、纤维二糖、乳糖、密二糖、棉子糖、松三糖、L-阿拉伯糖、D-甘露醇、D-山梨糖醇、肌醇、a酮基葡糖酸盐；不利用菊糖、可溶性淀粉；不同化硝酸钾；不液化明胶；50%(w/v)葡萄糖酵母膏琼脂培养基上不生长；40度不生长。

　　拉丁文名：Cryptococcus laurentii

　　其他编号：ATCC18803=CBS139

　　培养基编号：17,144

　　培养温度：25℃

　　分离源：棕榈酒

　　生理生化特征：

　　相关的培养基详细信息如下：

　　培养基编号：17

　　名称：Synthetic Potato Medium(综合马铃薯培养基)

　　可用于培养菌种：

　　适用范围：米曲霉、酱油曲霉、栖土曲霉、宇佐美曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、备注：20%Potato extract(马铃薯汁)1L Glucose(葡萄糖)20g KH2PO4 3g MgSO4.7H2O 1.5g Vitanib B1(硫胺素)Trace(微量)Agar(琼脂)15g pH 6

　　培养基编号：144

　　名称：YM培养基

　　备注：酵母提取物3.0 g麦芽提取物3.0 g葡萄糖10.0 g蛋白栋5.0 g琼脂20.0 g蒸馏水1000 ml pH 6.2+/-0.2

　　二、培养基

　　*麦芽汁琼脂培养基

　　*YM培养基（酵母粉3.0 g；麦芽提取物3.0 g；葡萄糖10.0 g；蛋白胨5.0 g；琼脂20.0 g；蒸馏水1000 ml；pH 6.2+/-0.2）

　　三、保藏条件

　　斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在2-8°C保存。西林瓶请置于-20°C保存。甘油管请置于-80°C保存;请勿长期置于室温。注意事项

　　1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取0.3ml的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过2支平板或者斜面）；

　　2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

　　3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

　　4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

　　5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25年；

　　6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或者不活等情况，请在收到菌种后2个月内联系，逾期不予受理；

　　7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

　　8）安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

　　9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。