OverExpress C43(DE3) 感受态细胞基本信息及操作说明

　　表达感受态细胞

　　平台编号：bio-109640拉丁属名：OverExpress C43DE3 Chemically Competent Cell规格：50支100ul

　　表达感受态细胞OverExpress C43(DE3)感受态细胞

　　表达感受态细胞---非电转（最常用、普通类感受态细胞）

　　保质期一年，可以备货

　　基因型

　　F–ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)

　　简要说明

　　OverExpress C43(DE3)、OverExpress C41(DE3)两个菌株均起源于BL21(DE3)，其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpress C41(DE3)跟BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白(1-5)的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞

　　死亡途径；OverExpress C43(DE3)来源于OverExpressC41(DE3)，是通过筛选OverExpress C41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。OverExpress C43(DE3)菌株具有比OverExpress C41(DE3)更强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，所以说OverExpress C43(DE3)菌株与BL21(DE3)相比拥有至少两个未知突变，正是这两个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。此菌株含有DE3区，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。OverExpress C43(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率可达5×10e8 cfu/μg DNA。

　　基因型：

　　F–ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)

　　基本信息：

　　产品规格：50支100ul

　　平台编号：bio-109640

　　产品信息：OverExpress C43(DE3)、OverExpress C41(DE3)两个菌株均起源于BL21(DE3)，其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpress C41(DE3)跟BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白(1-5)的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径；OverExpress C43(DE3)来源于OverExpress C41(DE3)，是通过筛选OverExpress C41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。OverExpress C43(DE3)菌株具有比OverExpress C41(DE3)更强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，所以说OverExpress C43(DE3)菌株与BL21(DE3)相比拥有至少两个未知突变，正是这两个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。此菌株含有DE3区，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。OverExpress C43(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率可达

　　5×10e8 cfu/μg DNA。

　　保存条件：-80℃

　　操作说明：

　　1.OverExpress C43(DE3)感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的质粒，并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。3.向离心管中加入700μl不含抗生素的LB无菌培养液，37℃，200 rpm复苏60分钟。4.5000 rpm离心一分钟收菌，留取50μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

　　5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

　　注意事项：

　　1.感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

　　2.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

　　3.诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2 mM均可）。

　　4.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。