细胞部分：

1、查阅相关文献，确定使用的细胞是否能够成瘤。

2、观察细胞状态是否良好，取对数生长期的细胞，密度达 80%-90%，收细胞的前一天需要更换培养基，收细胞时用胰酶消化后，用预冷的 PBS 洗两遍，去除多余血清。

3、用 PBS 调整细胞浓度，一般皮下瘤接种的细胞量为 1-5×10^6 个细胞/支，接种体积为 0.1ml，因此细胞悬液的浓度为 1-5×10^7 个细胞/ml。

动物部分：

1、裸鼠一般选择 6-8 周龄，体重为 18-20g 左右。

2、裸鼠饲养环境需要在 SPF 级，垫料、饲料及水都需要无菌，适应性饲养一周后即可接种。

3、裸鼠接种的部位选择血供丰富区域，如腋窝中后部、腹股沟中上部。

接种操作部分：

1、左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤，小拇指夹住裸鼠尾巴。

2、吸取细胞前需要将细胞吹打混匀，防止细胞成团。接种期间需将细胞置于冰上，且需要在半小时内完成接种。

3、接种时，针头在皮下进针深一点，减少注射后细胞悬液从针眼溢出。

4、接种后注意观察接种部位成瘤情况。